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时间:2018-05-07
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1、泼尼松龙对脂多糖诱导的RANTES的影响:朴花子,张成镐,方宇辉【关键词】泼尼松龙;小胶质细胞;RANTES;脂多糖 摘要:目的探讨泼尼松龙对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞激活时所分泌的趋化因子RANTES的影响。方法采用MEM培养液培养小胶质细胞,培养液中添加不同质量浓度的LPS(0、100、500、1000μg/L)及LPS(100μg/L)与10μmol/L的泼尼松龙后再培养12h,用ELISA法测定细胞外液所分泌的RANTES含量。结果LPS能高度激活小胶质细胞并且能使RANTES分泌增加,泼尼松龙明显抑制RANTES的含量。结论泼尼松龙
2、有抑制趋化因子RANTES的分泌作用。 关键词:泼尼松龙;小胶质细胞;RANTES;脂多糖 EffectofprednisoloneonLPSinducedRANTESproductionPiaoHuazi,ZhangChenggao,FangYuhui KEYCP1)和regulateduponactivationnormalTcellexpressedandsecreted(RANTES)等,导致继发性脑损伤。趋化因子是一类对白细胞游走和活化具有重要作用的蛋白超家族,除了具有对T细胞的募集功能外,还能参与调控多种生物过程,如细胞黏附、吞噬、
3、细胞因子产生、T细胞激活、血管生成与增殖等[34]。在各种原因所致的脑损伤过程中,趋化因子分泌增加,使炎症反应不断放大,会进一步加重脑损伤[5]。糖皮质激素类由于具有抗炎、稳定细胞膜的作用,多年来一直被作为重型颅脑损伤的重要辅助治疗药物之一[6]。泼尼松龙属于中效肾上腺皮质激素类药,主要用于严重的细菌感染和严重的过敏性疾病、各种血小板减少性紫癜、粒细胞减少症、严重皮肤病、器官移植的免疫排斥反应、肿瘤的治疗及对糖皮质激素敏感的眼部炎症等。本文研究了泼尼松龙对小胶质细胞被脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活时所分泌的趋化因子RANT
4、ES的影响。 1材料与方法 1.1实验试剂泼尼松龙和LPS为美国Sigma公司产品,细胞培养液用的MEM(minimumessentialmedium)为美国GibcoBRL公司产品,RANTESELISA试剂盒为美国RDSystems公司产品。 1.2方法取10只新生小鼠(1-2d龄),在无菌条件下,剪开颅骨,取出脑组织[7]。分离后的细胞用100mL/L热灭活胎牛血清的MEM培养液培养10d后使用。细胞接种于48孔培养板(3.5×105细胞/mL,0.2mL/孔)中12h后进行实验。实验可分为空白对照组(正常细胞)、LPS处理组(在培养液中
5、加入100μg/L的LPS)、泼尼松龙组(在培养液中加入10μmol/L的泼尼松龙)、试药组(LPS+泼尼松龙),并继续培养12h后,用相应的ELISA试剂盒来测定趋化因子RANTES含量。 1.3统计学处理实验各项数据用均数±标准差表示,采用t检验进行统计学处理分析。P<0.01被认为有统计学意义。 2结果 2.1LPS对小胶质细胞分泌RANTES含量的影响如图1所示,LPS能高度激活小胶质细胞并且能使RANTES分泌增加。在MEM培养液中培养小胶质细胞,培养液中添加不同质量浓度的LPS(0、100、500、1000μg/L),用ELI
6、SA法测定细胞外液所分泌的RANTES的含量。LPS处理后6h时细胞培养液中RANTES含量较空白对照组有明显增高,呈时间依赖性(图1)。 图1LPS对小胶质细胞分泌RANTES含量的影响(略) Fig.1LPSinducedRANTESproductioninmicroglia A:CulturedmicrogliaediumicrogliaulationbyELISA 2.2泼尼松龙对LPS诱导的RANTES含量的影响培养液中添加LPS(100μg/L)与10μmol/L的泼尼松龙后,再培养12h,测定细胞外液所分泌的RANTES的含量。
7、结果显示,泼尼松龙明显抑制RANTES分泌,与LPS组比较,差异具有统计学意义(P<0.01,图2)。 3讨论 小胶质细胞参与S的各种生理和病理过程。脑缺血后,反应性小胶质细胞一方面转化为吞噬细胞,通过吞噬死亡神经细胞残骸和变性的突触,有利于神经元再生和死亡周边区神经元的存活。另一方面通过释放和分泌一系列的神经毒性物质和炎性因子,如氧自由基、NO、超氧化物、TNFα、IL1β和蛋白酶等,导致继发性脑损伤。中枢神经系统的炎症反应与神经退行性疾病的发生密切相关,如Alzheimer症、多发性硬化、AIDS性痴呆、肌萎缩性脊髓侧索硬化及创伤后脑缺
8、血损伤。在这些疾病发生过程中,大脑定居的免疫细胞小胶质细胞发挥重要作用。大量研究结果证明,活化的小胶质细胞产
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