脑胶质瘤细胞系对细小病毒mvm和h1易感性的研究

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1、脑胶质瘤细胞系对细小病毒MVM和H1易感性的研究【摘要】　　［目的］测定人胶质瘤细胞系A172，U87MG，U138，U373，和鼠胶质瘤细胞系GL261与MT539对细小病毒MVM和H1的易感性，并观察野生型病毒在肿瘤细胞内部繁殖情况。［方法］体外培养肿瘤细胞，分别用不同剂量的MVM和H1病毒感染GL261，MT539和A172，U87MG，U138，U373细胞1h，继续培养5d，每天进行活细胞计数。空斑形成试验测定感染病毒（MOI=0.1）5d后细胞内部及细胞培养上清中的病毒总量。［结果］与未感染细胞（对照）比较，

2、U138，U373，GL261细胞在MOI2和5的病毒剂量感染后活细胞数目明显减少，U87细胞数基本维持不变，A172和MT539细胞数轻微增加。MOI=0.1的病毒剂量对细胞的作用与对照没有差异。空斑形成试验结果表明U373和GL261在MOI=0.1的病毒感染5d后细胞内和培养上清中总病毒量略高于初始病毒量，其它细胞的总病毒量均低于初始病毒量。［结论］不同胶质瘤对细小病毒的易感性不同，U138，U373，GL261细胞对细小病毒H1或MVM易感，U87细胞次之，A172和MT539细胞不敏感。U373和GL261细胞

3、有弱的产生子病毒的能力。【关键词】脑胶质瘤　细小病毒　易感性　肿瘤治疗　　SusceptibilityofGlioblastomaCellstoVMandH1Abstract:［Purpose］Toevaluatethesusceptibilityofhumangliomacelllines(A172,U87MG,U138,U373)andmurinegliomacelllines(GL261andMT539)toorcells.［Methods］GL261,MT539,A172,U87MG,U138andU373cel

4、lsberoflivingcellsountofvirusincellsandsupernatantinedbyplaqueassay(MOI=0.1)atthefifthdayafterinfection.［Results］AfterinfectionberofU138,U373,GL261decreasedmarkedly,U87MGunchangedandA172andMT539increasedalitterinparisonountofvirusesmeasuredatfifthdayafterinfectio

5、nilartotheamountofinitialinmostcelllines.U373andGL261samplesshoediumandA172,MT539arenotsusceptive.U373andGL261havea;parvovirus;susceptibility;cancertherapy恶性胶质母细胞瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤，常规的治疗方法，如手术切除、放化疗等都远不能达到治疗要求。近年来新出现的一些治疗策略显示出良好的前景，这其中包括溶瘤病毒治疗。细小病毒H1和MVM对肿瘤细胞和转化细胞

6、有选择性杀伤，而对正常细胞则无影响，即具有“亲瘤性”和“溶瘤性”，不整合到宿主的染色体中，迄今未发现对人类有致病性，其抗癌活性也在多种肿瘤和转化细胞内得到证实，因此非常有希望成为一个新的抗肿瘤制剂。本文测定了几种胶质母细胞瘤细胞系对野生型MVM和H1的易感性，探讨用细小病毒MVM和H1治疗胶质母细胞瘤的可能性。1材料与方法1.1材料细胞系：4种人胶质瘤细胞系，A172、U87MG、U138和U373，以及2株鼠胶质瘤细胞系，GL261和MT539，指示细胞NBE-324K和A9为德国癌症研究中心肿瘤病毒学研究室赠送。MV

7、M和H1病毒为德国癌症研究中心肿瘤病毒学实验室Dr.Rommelaere赠送。其他试剂购自SIGMA公司。1.2方法1.2.1细胞培养A172、U87MG、GL261和MT539细胞在含10%小牛血清、2mML-谷氨酸和抗生素的DMEM中培养，U138在10%小牛血清、2mML-谷氨酸和抗生素的RPMI培养液中培养，U373在10%小牛血清，2mML-谷氨酸和抗生素的MEM中培养。培养条件为37℃，5%CO2，90%湿度。1.2.2病毒易感性测定感染的前一天在6cm细胞培养皿中培养2.5×105细胞，次日吸除培养液，加入

8、0.4ml用不含血清的MEM稀释的病毒,病毒剂量为MOI(multiplicityofinfection)0.1，2，5，每一剂量接种10盘细胞，置于37℃，5%CO2，90%湿度孵箱,每隔10min轻轻摇动培养皿1次，以确保细胞与病毒的接触。1h后吸除病毒，加入4ml含10%血清的培养液培养5d，每天取出2盘细胞用