尿中修饰核苷检测在肝细胞性肝癌诊断中的意义

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1、尿中修饰核苷检测在肝细胞性肝癌诊断中的意义【关键词】核苷类,尿;癌,肝细胞;电泳,毛细管Abstract:Objective:Toinvestigatethevaluefordetectingthemodifiednucleosidesinurinefordiagnosingtheheaptocellularcarcinoma.Methods:Fourkindsofurinarynucleosides(M5U,I,Ac4c,X)from21preoperativeandpostoperativepatientsaryheap

2、tocellularcarcinomaorofliver,21casesinedancecapillaryelectrophoresis(HPCE).Results:Theaveragelevelof4kindsofnucleosidesfrompreoperativepatientsapostoperativepatientsa(P<0.01).Theaveragelevelof4kindsofnucleosidesfrompatientsapatientsorofliver,patientspatientsorof

3、liver,patientsorsize(P>0.05).Conclusion:Urinarymodifiednucleosidesmaybehelpfulindiagnosingtheheaptocellularcarcinoma.Theaveragelevelof4kindsofnucleosideshasclinicalsignificanceindifferentiatingbenignandmalignanthepatictumors.Keya,hepatocellular;electrophoresis,c

4、apillary修饰核苷是机体RNA代谢产物,RNA代谢产生正常核苷与修饰核苷,尿中修饰核苷的排量可以反映机体细胞的代谢速度。肿瘤细胞的增殖较正常细胞加快,导致修饰核苷的产生和排出增多。早期研究尿中修饰核苷需要收集24h尿。Gehrke等[1]研究表明用“随机尿样”检测,以核苷含量(nmol)/肌酐(μmol)作为标准可取得与24h尿样一样的结果,这大大方便了尿核苷的临床检测。近年来利用尿中修饰核苷作为恶性肿瘤的潜在诊断标记物已有报道[2-4]。本研究旨在探讨国人肝细胞性肝癌(HCC)患者与非HCC患者尿中修饰核苷的不同水平

5、,了解其诊断HCC的灵敏度及特异度。探讨尿中修饰核苷与HCC肿瘤大小、AFP等的关系,并探讨HCC患者治疗前后尿中修饰核苷水平变化。1材料和方法1.1研究对象HCC组:共21例,男19例,女2例,年龄34~76岁,平均(56.8±5.5)岁,均临床确诊并经手术后病理检查证实为HCC,均无远处转移。肝良性占位组:共10例,男4例,女6例,年龄33~74岁,平均(55.1±8.4)岁。其中血管瘤5例,单纯性囊肿3例,囊腺瘤1例,血管平滑肌脂肪瘤1例,均经病理确诊。肝硬化组(LC):共21例,所有患者均根据病史、临床表现、B超或C

6、T以及肝功能等实验室检查明确诊断。其中男17例,女4例,年龄37~73岁,平均(50.8±4.5)岁。ChildA级患者3例,ChildB级患者13例,ChildC级患者5例;均为失代偿期肝硬化患者。所有患者均符合下述排除标准:①除外内分泌、循环、神经及泌尿系统的原发性疾病。②除外其他部位的恶性肿瘤。③除外消化性溃疡、胰腺疾病、结肠疾病及肾功能衰竭等。④所有受试者在采标本前2周内未使用白蛋白、干扰素、生长抑素类药、胰岛素、激素类药物及对肝脏有损害的药物。正常对照组:共30例,为我院门诊查体的健康体检者,男24例,女6例,平均

7、(52.8±3.6)岁,全部排除心、肝、脑、肾、胃肠道、胰腺及内分泌系统的疾病,无用药史。4组间性别、年龄差异无显著性,具有可比性。尿液标本均于治疗前随机收集,并收集21例HCC组手术后3d内尿液标本。1.2实验部分1.2.1仪器和试剂:BeckmanMDQ毛细管电泳系统。RE5000型旋转蒸发器(北京成萌伟业科技有限公司产品)。直径25mm,0.45μm微滤膜。4种核苷标准品(M5U、I、AC4C、X)、内标3-脱吖尿苷(3-Dzu)、十二烷基磺酸钠(SDS)、二水合磷酸二氢钠(NaH2OP4·2H2O)和十水合四硼酸钠(

8、Na2B4O7·10H2O)均购自Sigma公司;苯基硼酸亲和凝胶(Affi-Gel601)购自Bio-Rad;未涂层石英毛细管柱购自河北永年锐沣色谱器件有限公司。4种核苷标样均溶于水,分别配制1.0mmo1/LM5U,8mmol/LI,1.3mmo1/LAc4c,0.8mmo1/LX,为

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