红脸颊草莓组培快繁技术研究

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1、“红脸颊”草莓组培快繁技术研究李彩华刘玲艳)摘要:以“红脸颊”草莓为试材,对草莓匍匐茎茎尖生长点进行组织培养,筛选出适合“红脸颊”草莓诱导分化培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L、继代增殖培养基为MS+BA1.0mg/L+IBA0.1mg/L、生根培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+白砂糖15g/L。关键词:草莓;红脸颊;茎尖生长点;组培快繁SpeedReproductionofStraalstyle="MARGIN:0cm0cm0pt;TEXT-INDENT:12.05pt;TEXT-ALIGN:center;mso-char-indent-count:1.0"

2、align=center>LiCaihua,LiuLingyan(TissueCultureCenterofHeilongjiangXiangfangFarmHaerbin,150038)Abstract:Thispaperisareportofspeedreproductionofstraentedaterialof“Honglianjia”straalstyle="MARGIN:0cm0cm0pt;TEXT-INDENT:12.05pt;mso-char-indent-count:1.0">Key;speedreproductionoftissueculture草莓((Fragaria

3、ananassaDuchesen)是蔷薇科、草莓属多年生的浆果植物,其果实鲜美,营养丰富。目前,草莓种苗的繁殖方法主要有葡萄茎繁殖和分株繁殖[1],草莓葡萄茎繁殖系数较低且多带病毒苗,导致草莓品种退化、产量、质量下降。利用草莓微茎尖(0.2-0.5mm)脱毒结合组织培养快繁技术培育出的草莓组培苗,可部分或全部脱除病毒,使品种的优良性状得以保持,产量提高[2]。“红脸颊”是日本静冈县农业试验场以章姬和幸香杂交获得的草莓品种,1999年命名,之后引入我国。该品种具有生长势强、果大、果面及果肉鲜红色、甜酸适口、品质优、产量高、耐贮运、中等抗病性等特点[3],深受广大栽培者的喜爱。为使“红脸颊”草

4、莓得到进一步的推广应用,我们对这一品种进行了组培研究,为逐步建立稳定的高频再生系统,实现脱毒草莓工厂化育苗、规模化生产提供技术支持。1材料和方法1.1材料材料于2006年选自黑龙江省香坊实验农场草莓繁育基地,为7、8月份的匍匐茎茎尖。1.2方法取1-1.5cm长的匍匐茎茎尖,用流水冲洗30-90min,先用75%酒精消毒30s,再用无菌水冲洗3-5次,然后用0.1%的升汞处理8-10min,最后用无菌水冲洗5-6次。在超净工作台上剥取0.5mm的草莓茎尖生长点,接入诱导分化培养基中。以MS为基本培养基,加蔗糖30g/L,琼脂6g/L,PH5.8。培养室温度为(25±1)℃,光照强度1500

5、-2000lux,光照时间每天12h。诱导培养基为MS+BA0.5-1.5mg/L+NAA0.01-0.1mg/L;继代增殖培养基为MS+BA1.0mg/L+IBA0.01-0.15mg/L;生根培养基为MS、1/4MS、1/2MS+NAA0.5mg/L、1/2MS+NAA0.1mg/L。2.结果和讨论2.1茎尖的诱导分化培养在如表1所示的试验中,每处理接种40瓶材料(1瓶接1个芽生长点),重复实验3次。在接种45d后统计萌芽率(不计污染瓶数)。计算公式为:萌芽率(%)=发生萌芽的外植体数/接种的外植体数×100%从表1中分析得出:各处理组对“红脸颊”草莓茎尖都能诱导出芽,从NAA的浓度影

6、响来看,最适浓度为0.05,当浓度过高时,萌芽率减少,当NAA浓度为0.05时,添加BA的浓度为1.0mg/L时,芽的诱导率最高,为78.3%。但从诱导的试管苗来看,后一组的试管苗叶片出现了畸形,叶柄变脆,芽丛呈莲座状,是由于激素浓度过高所致[4]。由此可见,“红脸颊”草莓茎尖诱导的培养基为MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L。在诱导分化培养过程中发现,接入培养基的茎尖生长点太细小或剥取操作时间过长,都易死亡,接材较大易成活,但脱毒草效果差。故剥接茎尖时,需经多次试验,接入的茎尖生长点在可以成活的前提下越小越好。表1BA与NAA对“红脸颊”草莓茎尖诱导分化的影响处理外植体数(个

7、)萌芽率(%)BA(mg/L)NAA(mg/L)0.500.015322.60.500.055853.40.500.105630.41.000.015427.81.000.056078.31.000.105832.21.500.015228.81.500.055961.91.500.105722.82.2继代培养将诱导出的健壮试管苗转接到继代培养基上,每组培养基转接10瓶,每瓶接苗3株,培养25天后调查芽的增殖情况,结果

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