铁皮石斛组培快繁技术研究

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1、铁皮石斛组培快繁技术研究应注意调节环境因子与组培苗的生长关系，才能确保成活率。..[关键词]铁皮石斛组培快繁外植体分化增殖培养生根培养铁皮石斛(DendrobiumCandi—..dumWal1．exlind1．)为兰科多年生草本，属附生兰类。明代李时珍的《本草纲目》中记载：石斛除痹下气、补内脏虚劳赢瘦，强阴益精。久服，厚肠胃，补内绝不足。来胃气，长肌肉，益智除惊，轻身延年。道教医学经典《道藏》中，铁皮石斛名列中华..“九大仙草”之首。我国野生的铁皮石斛资源主要分布在皖、浙、云、贵、川等地高山峻岭的悬崖峭壁和岩石缝隙中L1J。由于铁皮石斛生长条件的特殊性和分布的局限性，又经长期采挖，自然资源濒

2、临枯竭，国内市场供应紧缺，国际市场每千克干品价已达..10000美元以上。1987年国务院将铁皮石斛列为重点保护的中药材之一。植物组培快繁技术是解决植物优良无性系用苗的良好途径_2]，为了保护这一珍贵植物天然资源，推广人工培植技术，我们对其科技园地..AcademicField—快繁技术研究*八。罗敦。蓝玉甜。刘世勇广西凭祥..532600；2．广西雅长林场)生第十———期OOO}行了研究。亏方法g繁殖材料(无菌种长林场提供。..化与芽增殖将无菌种子苗的原球茎接种在不同生长素与分裂素不同浓度的分化增殖培养基上，以筛选增殖分化效果最佳的培养基。培养温度为..25～28℃，光照条件为..6～8h／

3、d。分化增殖试验培养基的配制采用正交设计，设计因子与水平见表..1。表1增殖正交试验设计因子与水平..1．2．2组培苗的生根培养苗芽增殖到一定数量后进行生根培养，生长调节剂选用..NAA、IBA、6一BA。根的诱导培养基的筛选也采用正交设计方法，设计因子与水平见表..2。表2生根正交试验设计因子与水平因子平31MS3V31111~／..~／vz／1~2V131V14~2NAA(mg／L)O．51．O2．04．03IBA(mg／L)O．51．02．O4．046-BA(mg／L)0O．03O．10．5林..前将培养瓶放置室外炼苗..7～..1Od，业然后取出洗净培养基，移植在装有实用泥炭土与苔藓的

4、营养杯中。先在保技术..温、保湿、弱光的情况下培育..20~30d，再逐步过度到大棚育苗条件下培2．1原球茎芽的分化与增殖无菌种子苗的原球茎外植体接种在分化增殖培养基上进行球茎的分化与增殖培养试验。40d后进行统计分析。计算分化繁殖系数(见表..3)。表..3正交试验原球茎的分化增殖系数根据统计结果分析可知：6一BA与..NAA两种因子的极差较大，证明原球茎分化增殖效果对该两种激素浓度水平的变化极为敏感。根据正交试验设计的分析可得出..4种增殖效果较好的水平组合：A(MS+6-BA0．5mg／L+KT1．0mg／L+NAA0．1mg／L)、B(MS+6一BA0．5mg／L+KT1．0mg／L+

5、NAA0．5mg／L)、C(MS+6一BA1．0mg／L+KT1．0mg／L+NAA0．1mg／L)、D(MS+6-BA1．0mg／L+KT1．0mg／L+NAA0．5mg／L)。由于生物激素间的交互作用异常复杂，还不能按正交设计的统计方法肯定最利。．．．3移偎田百佳水平的组合对苗木的增殖效果也库库营营速誊与可持续．用?项目编号：..111基2000因..25．..，土生根偎田苗H的修栽生就，土根苗培J一DIB6J1114。养至高3～5cm时开始移栽。移栽..定最佳。为此，我们按以上4种二OO八年第十一期林业实用技术科技园地..AaecFedcdmiil组合配制培养基又做了一次验证试验，结果.

6、.A、B、C、D4种培养基的繁殖系数分别为..3．3、4．3、2．2、2．7。由此可证，明铁皮石斛兰原球茎的分化增殖效果最佳培养基B：MS+6-BA0．5mg／L+KT1．0mg／L+NAA0．5mg／L。..2．2铁皮石斛兰组培苗生根培养表4正交试验生根率统计因子..12警..4极差..1MS0．380．410．390．340．072NAA(mg／L)0．360．4O0．440．310．133IBA(mg／L)O．310．420．510．330．2046-BA(mg／L)0．360．410．520．270．25为了寻找生根率较高的激素种类与配比，我们采用了..NAA、IBA、..6一BA3种

7、激素进行正交试验设计配制培养基(见表..2)。将组培芽苗接种人试验培养基..30d后统计生根率。根据表4的统计结果表明：IBA与6-BA两种激素的极差较大，证明该两种激素为主要调节因子。根据正交试验的设计的统计分析方法，我们可以总结出4种较好的水平组合：A(1／2MS+NAA2．0mg／L+IBA10mg／..-．3r／．..L+6BA00agL)、B(1／2MS+NAA2．0mg／L+丹红扬、睡