春石斛组培快繁技术的研究

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1、摘要春石斛(DendrobiumNobiI)是兰科石斛属多年生附生兰，因花期常常在春季而得名。因其花多、花型优美、色彩新艳，盆栽摆放别具一格，再加上管理粗放，很适合家居栽植和摆设，所以流行于日本、欧美等发达国家。但目前由于专业性培育春石斛的整体水品不是很高，关键的生产环节技术薄弱，造成春石斛繁殖系数偏低，工业化生产效率不高，许多名贵品种短缺，品质较低，且市场售价较高。因此建立和完善春石斛组培快繁技术是解决这一问题的重要途径。本试验以春石斛花后假鳞茎带节茎段为外植体诱导丛生芽，研究以丛生芽途径建立植株再生体系。主要围绕外植体灭菌、腋芽诱导、

2、丛生芽增殖、壮苗生根、炼苗移栽等几方面进行，集中研究不同灭菌方法、不同基本培养基类型、不同激素配比和浓度、不同添加物、不同碳源等多个方面问题。试验中的培养基方案均采用正交设计，数据采用SPSS软件分析。通过试验，获得如下主要结果：l、以春石斛开花后假鳞茎带节茎段为外植体，最佳的灭菌方法是II处理组，即假鳞茎带节茎段一自来水冲洗一洗衣粉上清液浸泡lOmin并用软刷刷去表面污垢一自来水冲洗30min-'．-置于超静工作台上705酒精浸泡20s一无菌水冲洗4次-'-0．1％HgCI。浸泡15min----无菌水冲洗8次一取出吸干水分并除去包叶一

3、接种，成活率达80％。2、影响春石斛假鳞茎带节茎段诱导腋芽的主要因素是基本培养基、细胞分裂素队和天然添加物，其次是NAA。丛生芽诱导最适宜的培养基配方为1／2MS+BAl．5mg／L+NAA1．0mg／L+椰汁150．0mL／L+食糖30．0g／L+琼脂7．0g／L，pH5．4，诱导达94．47％。3、影响春石斛丛生芽增殖的主要因素是：(1)基本培养基，以1／2MS最佳；(2)细胞分裂素BA，以1．0mg／L最佳；KT以0．5mg／L最佳；(3)生长素NAA，以I．Omg／L最佳。其次，试验中发现添加物、培养基pH值、接入茎段长度、丛植密

4、度对丛芽增殖有显著影响。丛生芽增殖的最适宜的培养基配方是I／2MS+BAI．0mWL+NAA1．5mg／L+KT0．5mg／L+食糖30．Og／L+琼脂6．09／L+椰汁150．OmL／L，pH5．4。4、最适宜壮苗生根培养的培养基配方为：改良MS(以复合肥N：P：K=20：20：20代替MS中的大量元素)+BA0．5mg／L+NAAI．0mg／L+香蕉泥100．09／L+蔗糖30．Og／L+琼脂7．Og／L，pH值5．4。5、春石斛移栽时，先在室内炼苗7天，再进行移栽，试验发现水苔是较好的移栽基质，成活率高达91．67％。通过上述试验，

5、全面研究春石斛组培快繁各阶段的主要影响因素和最佳培养基配方，筛选出最优技术参数组合，建立春石斛最优再生体系，提高丛生芽增殖系数，进而提高春石斛商业化生产效率，解决目前市场上春石斛优良品种短缺的问题，为春石斛专业化育苗提供技术支持。关键词：春石斛，组织培养，快速繁殖，外植体，丛生芽，增殖，移栽IIAbstractDendrobiumNobilisthecrossbreedofCheseDendrobiumnobilLindl．Itblossomsalwaysinspringandisusedaspottesdplant．Becuaseofi

6、tsmanifoldcolorofflowerandbeautifulgesture，itispopularwimEuropeanandJapanese．ButnowbecauseoveralllevelofprofessionalproductionofDendrobiumNobilisnothigh,andthekeytechnologiesofproductionareweak,thoseresultinhigherproductioncosts，lowpropagationcoefficiemandinefficientindus

7、trialproduction．Inthesametime，manyexpensivevarietiesareinshortage，lowqualityandhighmarketprices．ThereforeDendrobiumNobiltissuecultureresearchisthekeytosolvingthisproblem．TheaxillarybudsofthefalsebulbofDendrobiumNobilweretakenasexplantstoinducebudclumpsandthisregenerationw

8、ayof．propagationwerestudiedinthisexpcrimem．Thisexperimentresolvedaroundthebestwaystoexterminateg