牡丹组培快繁技术的研究

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1、分类号UDC密级编号硕士学位论文牡丹组培快繁技术的研究StudyonRapidPropagationTechniqueofTissueCultureinTreePeony学位申请人：田真指导教师：史国安教授、施江副教授一级学科：生物学二级学科：植物学学位类别：理学硕士2015年6月独创性声明本人声明，所呈交的论文是我个人在导师指导下完成的研究工作及取得的研究成果。据我所知，文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河南科技大学或其它教育机构的其他学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明

2、并表示了谢意。研究生签名：日期：摘要摘要牡丹观赏价值高的品种，雄蕊、雌蕊大都高度瓣化，导致种子发育不全或无结实力，而传统分株、嫁接繁殖方法，繁殖系数低且周期长。采用组培技术可在短时间内获得大量试管苗，既为牡丹新品种培育和定向改良提供遗传转化再生体系，又为牡丹种苗商品化提供技术支持和理论依据。本研究以黄色系牡丹中的中晚期品种‘金阁’和‘海黄’为研究对象，以主茎基部鳞芽为外植体，研究了不同取材时期对牡丹试管苗生长的影响，筛选出了外植体最佳取材时期；探讨了不同种类和浓度的生长调节物质对牡丹试管苗增殖及生根的影响，并得出了最适宜其增殖和生根的激素配比；分析了在增殖培养过程中AgNO3对其增殖

3、和褐化的影响，测定了引起褐化的相关生理生化指标。主要研究结果如下：（1）以‘金阁’和‘海黄’的鳞芽为外植体，从2013年10月到2014年4月，每月20日取样。将鳞芽接种在MS培养基附加0.6mg/L6-BA和0.2mg/LNAA中培养，观察取材时间对牡丹‘金阁’和‘海黄’组培污染率和褐化率以及苗体生长的影响。结果表明：从10月份到翌年4月份均可用牡丹鳞芽进行组培快繁，以3-4月的外植体生长最好，冬前10到11月的牡丹鳞芽需要进行适当的低温与黑暗诱导，以便解除牡丹鳞芽的休眠状态。每年3-4月份是牡丹组织培养的鳞芽外植体最佳取材时期。（2）对比‘金阁’和‘海黄’增殖培养的单因素试验和正

4、交试验结果可以看出，单独使用一种激素对牡丹的增殖有一定作用，激素复配可使两个品种的增殖系数均大于单独使用。牡丹‘金阁’最佳增殖培养基组合为MS+6-BA0.6mg/L+NAA0.2mg/L+KT0.9mg/L+TDZ0.06mg/L，牡丹‘海黄’最佳增殖培养基组合为：MS+6-BA0.9mg/L+NAA0.3mg/L+KT0.9mg/L+TDZ0.04mg/L。其对‘金阁’增殖影响TDZ＞KT＞6-BA＞NAA，而对‘海黄’增殖影响6-BA＞KT＞TDZ＞NAA。（3）培养基附加不同浓度AgNO3，显著抑制‘金阁’和‘海黄’试管苗的褐变。在增殖培养基中附加1mg/L和2-3mg/L的

5、AgNO3能有效抑制‘金阁’和‘海黄’试管苗的褐变，也抑制了其增殖。随着AgNO3浓度的增加，‘金阁’和‘海黄’试管苗褐化度呈现先下降后升高趋势且与SOD、POD和CAT活性呈显著负相关·-关系，与试管苗MDA含量、乙烯释放速率、PPO活性、O2产生速率和多酚含量呈显著正相关关系。但将在不同AgNO3浓度处理20d后的‘金阁’和‘海黄’试管苗转接到不含AgNO3的最适增殖培养基上继续培养，不仅能有效抑制试管苗I摘要的褐化还能促进其增殖，其中1mg/LAgNO3预处理的‘金阁’试管苗增殖系数达到最大为4.6倍，而2-3mg/LAgNO3预处理‘海黄’试管苗的增殖系数略有增加。（4）在‘

6、金阁’和‘海黄’的生根培养中，IBA是主要因素。‘金阁’最佳生根培养基组合为1/2MS+IBA4mg/L+NAA0.1mg/L+活性炭1g/L，‘海黄’最佳生根培养基组合为1/2MS+IBA6mg/L+NAA0.1mg/L+活性炭2g/L。关键词：牡丹；组织培养；取材时期；增殖；褐化；生根论文类型：应用基础研究选题来源：国家自然科学基金项目IIABSTRACTABSTRACTAbouttreepeonyvarietieswithhighornamentalvalue,thestamensandpistilshighlytopetalled,leadingtoseedsdysplasi

7、a,unabletobearseeds,whiletraditionalramet,graftingpropagationmethodshaslowpropagationcoefficientandlongreproductioncycle.Usingtissueculturetechniquescanobtainmanytest-tubeplantletsintheshorttime,notonlyprovidingthegenetictransform