口服鱼油对急性胰腺炎大鼠炎性反应及免疫功能的影响

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1、口服鱼油对急性胰腺炎大鼠炎性反应及免疫功能的影响【关键词】急性胰腺炎;鱼油;酶联免疫吸附试验;肿瘤坏死因子;白细胞介素-10;大鼠[Abstract]Objective:Toestimatetheeffectoffishoiloninflammatoryreactionandimmunefunctionofacutepancreatitisinrats.Method:70ratsrandomlydividedintofourgroups:no-APgroup,AP-monenteralnutritiongrou

2、p,AP-cornoilgroup,AP-fishoilgroup.ThemodelofAPmatoryreaction,andmodulatetheimmunefunctionofacutepancreatitisrats.[Keye-linkedimmunosorbentassay;Tumornecrosisfactor;Interleukin-10;Rat急性胰腺炎(acutepancreatitis,AP)发病凶险,其重症急性胰腺炎的死亡率高达20%左右[1]。近10多年来随着对重症急性胰腺炎研究的进展

3、,已经认识到重症急性胰腺炎是一种由局部组织坏死引起的全身炎症反应综合征。其中细胞因子、免疫细胞和补体系统介导的炎症级联反应可能是导致全身炎症反应综合征的根本原因。在营养配方中添加特异的营养素不但能够预防和纠正营养不良,同时还能够调节免疫细胞功能,使机体维持正常、适度的免疫反应。n-3多不饱和脂肪酸主要以鱼油的形式存在,是营养免疫因子的重要组成部分,近期的研究发现,它对多种免疫细胞具有抑制作用,使其在免疫治疗中具有较好的应用前景[2,3]。本试验利用大鼠胰腺炎模型,探讨口服n-3多不饱和脂肪酸对大鼠血液中免疫因子

4、表达水平的影响。1材料与方法1.1动物与分组所用试验动物均为雄性SD大鼠(北京维通利华公司),体重250~280g。所用肠内营养为瑞素(江苏无锡华瑞制药公司),所用鱼油及玉米油购自Sigma公司。第1组为随机抽10只大鼠不进行胰腺炎诱导(无胰腺炎组);将胰腺炎大鼠随机分为3组,每组20只,第2组为普通肠内营养组(AP-普通营养组);第3组在营养中添加玉米油(AP-玉米油营养组);第4组在营养中添加鱼油(AP-鱼油营养组),鱼油中脂肪主要是n-3多不饱和脂肪酸,而玉米油中无此成分。各组抽血检测相关指标。1.2试验

5、方法术前24h禁食,氯胺酮腹腔内麻醉。经十二指肠乳头逆行插入细聚乙烯管,恒速注入2.5%牛磺胆酸钠0.6ml/10min。当胰腺发生水肿出血、局部呈暗红色时,证实建立模型成功。所有大鼠经右颈内静脉插管建立静脉输液通道,以及经胃造口置内径1.0mm硅胶管于空肠上段2.0cm处。术后第1天给与林格氏液400ml·kg-1·d-1,第2天开始分别行肠内营养,每天按240ml·kg-1给予瑞素,鱼油及玉米油毫升数按体重的0.6%给予。术后第7天终止试验,取材检验。细胞因子的检测:取外周静脉抗凝血1ml,于4℃下1500

6、r·min-1离心10min,取上清,分装冻存于-80℃冰箱,集中采用ELISA法检测TNF-α和IL-10水平。另取外周抗凝血1ml加入CD4、CD8单抗,室温静置15~25min,加红细胞裂解液500μl,静置10min,1000r·min-1离心5min弃上清,磷酸盐缓冲液洗涤后加入1%FPA50μl混匀,流式细胞仪(BectonDickinson公司)检测T细胞亚群分类。1.3统计学方法计量资料用x±s表示,用SPSS11.0统计软件做方差分析两两比较用q检验,P<0.05示差异有统计学意义。2.2外周

7、血T细胞亚群流式细胞仪检测CD4+及CD8+细胞占总淋巴细胞的比例及CD4+/CD8+比值见表1。2.3外周血细胞因子的变化TNF-α、IL-10浓度和IL-10/TNF-α变化见表2。由表1中数据可以看出,AP-玉米油营养组与AP-普通营养组比较,CD4+及CD8+细胞占总淋巴细胞的比例均无明显差异(P>0.05),CD4+/CD8+比值也无明显差异(P>0.05);而AP-鱼油营养组与AP-普通营养组比较,CD4+/CD8+比值明显升高(P<0.05);AP-鱼油营养组与AP-玉米油营养组

8、比较,CD4+/CD8+比值也明显升高(P<0.05)。由表2数据中可以看出,所有AP组与无胰腺炎组比较血液中TNF-α和IL-10的浓度有明显升高(P<0.05);而AP-鱼油营养组与AP-普通营养组及AP-鱼油营养组与AP-玉米油营养组比较,血液中TNF-α和IL-10的浓度明显降低(P<0.05),IL-10/TNF-α的比值也明显降低(P<0.05)。3

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