高脂血症对孕期大鼠急性胰腺炎的影响论文

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1、高脂血症对孕期大鼠急性胰腺炎的影响论文【摘要】目的:探讨高脂血症对孕期大鼠急性胰腺炎(AP)的影响。方法:妊娠大鼠随机分为实验组(高脂饲料)和对照组(均衡饲料),分别喂养16d后,用L-精氨酸盐酸盐(L-Arg)溶液(250mg/100g)进行腹腔注射,1h后再次腹腔内注射(200mg/100g)。计算48h内大鼠死亡率,分别于末次注射后0、12、24和48h检测血清甘油三酯(TG)、淀粉酶(AMS)和脂肪酶(LPS);计算胰腺湿/干重比值;观察胰腺组织的病理变化并评分,免疫组化SP法检测胰腺组织Bax表达。结果:实验

2、组死亡率8.3%,对照组0.0%。实验组TG较对照组明显升高(P0.05);实验组AMS、LPS峰值分别在24、12h出现,对照组都在24h出现且明显较实验组低(P0.05)。在L-Arg末次注射后12、24h.freeliaonacutepancreatits(AP)ofratsduringpregnancy.Methods:SDratsinpregnancylydividedintothetestgroupandthecontrolgroup,fedfor16daysseparately.Ratsinpregnan

3、cyes(thefirsttime250mg/100g,thesecondtime200mg/100g)atanintervalofonehour.Afterthelastinjection,themortalityofratsinpregnancytriglyceride(TG)、serumamylase(AMS)、lypase(LPS)frombloodsamplesandicroscopicchangesinedbySPimmunohistohemicaltechnique.Results:Afterthelas

4、tinjection,themortalityofthetestgrouporeseriousandthepancreatichistopathologicalscoreia.BaxgenemaycontributetoacinarcellapoptosisandreducetheseverityofAP.[KeyediaCyberics公司,美国)。1.3方法1.3.1动物分组及模型制备大鼠按雌雄比(2∶1)合笼进行交配,饲养于标准动物房(22℃),给予规律光照(12h∶12h),自由饮食。发现有阴道栓后记为妊娠第1

5、d,并随机分为实验组[高脂饲料(83%的均衡饲料,15%的猪油,2%的胆固醇)]和对照组(均衡饲料),每组24只。所有大鼠在实验前禁食12h,自由饮水。两组分别喂养16d后,用L-Arg溶液先于腹腔内注射(250mg/100g),1h后,再次腹腔注射(200mg/100g)。1.3.2标本制备两组分别于末次注射L-Arg溶液后0、12、24和48h各取6只处死(如处死时未发现大鼠怀孕,不纳入实验),取门静脉血,分离血清,-70℃冰箱保存。同时切取大鼠胰腺组织,一分为二,一部分备于胰腺湿/干比率测定,另一部分用多聚甲醛固

6、定,石蜡包埋,备用于组织病理学检查及免疫组化检测。1.4观察指标1.4.1两组死亡率观察两组在注射后各时间点的死亡情况并计算其死亡率。1.4.2血清TG和淀粉酶(AMS)、脂肪酶(LPS)用CX9全自动生化分析仪检测。1.4.3胰腺湿/干重比值两组大鼠于各时间点处死后,切取的胰腺组织于电子天平上称重(湿质量);再将切取的胰腺组织于60℃烘干24h,至质量不变为止(干质量),计算湿/干重比值。1.4.4胰腺组织Bax表达采用免疫组化SP法,其操作步骤严格按SP免疫组化染色试剂盒说明进行,结果判断:胰腺细胞胞浆染色呈棕褐色

7、或棕黄色为阳性细胞。免疫组化结果用SPOT及IPP图像采集分析系统处理,40×10视野下观察采集图像,Imageproplus4.1版专业图像分析软件处理结果,以平均光密度值表示Bax表达的相对强度,由病理科医生进行双盲检验。1.4.5胰腺组织病理学改变及病理评分(表1)石蜡切片,苏木精-伊红染色,光镜下观察其病理改变,并按照Schmidt镜下病理评分标准[5]由病理科医生进行双盲评分。表1胰腺组织病理评分标准(略)1.5统计学处理全部数据以x±s表示,计量资料结果采用SPSS11.0软件进行方差分析;组织病理学评级比

8、较采用秩和检验,检验水准为α=0.05。2结果2.1两组死亡情况实验组12、24h死1只,24、48h死2只,总死亡率8.3%。对照组48h内无死亡。2.2血清TG和AMS、LPS的测定结果在相同时间点,实验组比对照组TG明显升高(P0.05);实验组的AMS、LPS值分别在24、12h出现,而对照组都在24h出现且明显比实验组降

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