中国医药生物协会骨库分会主审化学去细胞异体神经修复神经缺损长度的实验研究

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1、中国医药生物协会骨库分会主审化学去细胞异体神经修复神经缺损长度的实验研究作者：孙明学，卢世璧，唐金树，王鑫，赵斌，眭翔，许文静，张莉【关键词】异体移植摘要：［目的］研究神经长度是否影响化学去细胞神经的质量及化学去细胞异体神经修复犬神经缺损的适当长度范围。［方法］切取犬的坐骨神经全长，截取直径近似段长度12cm，去除神经外膜的脂肪组织及血管，在50％TritonX100和50％脱氧胆酸钠中重复消化得到化学去细胞神经；部分神经用于组织学评价，将12cm神经按顺序切割为6段，石蜡包埋制备切片，厚度5μm。HE染色和Fastblue染色，观察去细胞程度

2、、神经细胞外基质结构完整性、髓鞘染色强度，观察每段神经的差异。在体内实验中，用化学去细胞异体神经桥接犬的坐骨神经缺损，缺损长度分别为8、10cm组，每组各有6条成年犬，随访时间12个月。观察动物肢体功能恢复、肌电图变化及再生神经组织学表现，包括HE染色、S100免疫组织化学染色、乙酰胆碱酯酶染色。［结果］去细胞神经全长各段在去细胞程度、结构完整性及残余髓鞘染色综合评价中无差异。体内移植实验结果显示8cm去细胞异体神经移植组的犬在术后12个月踝关节可直立行走，而10cm去细胞异体神经移植组犬12个月时踝关节不能直立行走。肌电图检查结果显示，两组动

3、物的手术肢体均可记录到诱发的运动和感觉电位。肌电图波幅、时限及运动神经传导速度结果显示，8cm移植组明显高于10cm移植组(P<005)。组织学检查显示8cm移植组再生的神经轴突通过移植段神经到达远侧的神经中，并与所支配的肌肉建立新的运动终板联系，坐骨神经支配的小腿三头肌中有大量新生的运动终板形成。在10cm移植组有部分再生的神经纤维通过移植段神经进入远端的神经，小腿三头肌中新生的运动终板数量和大小明显低于8cm移植组(P<005)。［结论］在化学去细胞神经的制备中，神经的长度对去细胞的质量无影响；化学去细胞异体神经修复神经缺损的长

4、度若不超过8cm可取得较满意的功能康复结果。关键词：去细胞神经；异体移植；再生　Abstract：［Objective］Thepurposeofthispaperistodemonstrateadultdogsanddividedinto12cmlongsegments.Thenervesegmentsprovedchemicaldecelluarizationtreatmentasfolloentsergedin5%Triton100solution12h,andthensoakedthenervesegmentsinto5%sodiumde

5、oxycholatefor12h.Thetreatednervesegmentsyelinationandintegrityofnervefibertubalofchemicallyextractedacellularnervesicroscopeandassessedbyascoresystem.Invivo,thesciaticnerveofdogsontherightgraftedgroup(n=6),a7cmsegmentofsciaticnerveovedfromthemidthighlevel.In10cmgraftedgroup(

6、n=6),a9cmsegmentofsciaticnerveovedatthesamelevel.Thegapsand10　cmlongsegmentsrespectively.Thefolloonthpostoperatively.Motorfunctionalrecoveryoftherighthindfolloinedbyneurobehavioral,electrophysiological,histologicalandimmunohistochemicalassessment.［Result］Thereyelinationandin

7、tegrityofnervefibertubalamongeveryfractionoftheacellularnervefromthetgraftedgroup,allsurvivaldogs(n=5)bextendedsothatthebody'setatarsusandtoes.In10cmgraftedgroup,animalsb.Electrophysiologicalstudiesshoyographicactivityonththeconductionvelocity/sin8cmgraftedanimalsand183+6.0m

8、/sin10cmgraftedgroup.Innormalanimals,theconductionvelocity/s.Theconductionv