化学去细胞神经与自体神经移植桥接修复大鼠坐骨神经缺损的对比研究

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1、bychemicalextraction．Theresultofthegroupthattreatedwiththeautograftsisbetterthanthegrouptreatedwiththeacellularnervesegments·KeywordsAcellular；Sciaticnerve；Nervegap；Nervetransfer；Nerveregeneration；Tissueengineering；Rats7·英文缩略语·_————————————_——_—————————————一英文缩写英文全称中文全称一————————————————————————————

2、———一PBSPhosphatebufferedsolution磷酸盐缓冲液SPFSFI脏NCVSpecificpathogenfree无特定病原体SciaticnerVe缸lctionindex坐骨神经指数Hematoxylinandeosin苏木精一伊红NeⅣeconductionvelocity神经传导速度CMAPCompoundmuscleactionpotential复合肌肉动作电位SPSSSatisticalpakageforthesocialscience社会科学软件统计包8·论文·化学去细胞神经与自体神经移植桥接修复大鼠坐骨神经缺损的对比研究=-gr,皇}n，看周围神经损伤并

3、形成缺损会给患者带来严重的肢体功能障碍，治疗仍然面临着巨大挑战。神经缺损的距离超过神经直径4倍者通常需要神经移植。到目前为止，自体神经移植是最基本和最可靠的方法，仍作为神经缺损修复的“金标准"。但是由于自体神经来源有限，移植神经多为腓肠神经等细小的皮神经，无法满足较大神经缺损和广泛神经缺损修复的需要，且会导致供区感觉神经新的功能丧失，瘢痕形成和神经瘤性疼痛，这些缺点限制了其在临床上的广泛应用。因此，人们一直在努力寻找自体神经的替代物来桥接神经缺损。自1880年(}luck、Vanlain首先报道用脱钙骨制成的骨性支架桥接周围神经缺损以来，多种天然及合成材料被用来桥接周围神经缺损，如硅胶管、聚

4、乳酸、聚乙醇酸、聚乳糖、壳聚糖、血管、骨骼肌、膜管等。但是，这些材料也有导致局部酸性环境，缺乏细胞识别信号，吸收瘢痕、组织增生及粘连等缺点。近年来很多学者转而探索异体神经移植修复神经缺损的方法。异体神经不但具有其它材料所没有的网管状神经内部结构，利于神经的再生，而且来源广泛，可以得到与缺损神经长度直径相似的移植物。需要解决的就是免疫排斥反应问题。神经内的主要组织相容性抗原主要分布于雪旺细胞和其它非神经细胞的细胞膜表面，神经膜结构的抗原性则非常弱“1。所以去除细胞，保留细胞外基质结构的方法，可显著降低同种异体神经的抗原性，而保留的生物活性成分和神经管状结构可为神经再生提供良好环境瞳3。我们用化

5、学萃取法去除同种异体神经内的细胞，用它桥接修复大鼠坐骨神经缺损，并与自体神经移植修复做对照，研究该移植物修复神经缺损的效果，为周围神经组织工程学的进一步研究打下基础并为临床应9用提供实验依据。一、材料材料和方法(一)实验试剂Triton-X100，脱氧胆酸钠，水合氯醛，硫化钠，氯化钠，十二水合磷酸氢二钠，二水合磷酸二氢钠，40％甲醛溶液，尼氏染液(上海碧云天生物技术有限公司)，硝酸银，氨水，硫代硫酸钠，苏木素，伊红，碘酸钠，十二水合硫酸铁铵(铁明矾)。㈢实验试剂配制1、脱毛剂40毫升75％乙醇与60毫升去离子水混匀后加入6克硫化钠。2、PBS溶液(1)0．2mol／LNail2P04溶液的配

6、制：称取NaH2P04·2H：O31．2克，加去离子水至1000毫升溶解。(2)0．2moYLNa2HP04溶液的配制：称取Na2HP04-12H：071．632克，加去离子水至1000毫升溶解。(3)0．2mol／LpH7．3PB的配制：取23毫升0．2moFL的NaH．2P04和77毫升0．2mol／L的NaEHP04，充分混合即为0．2mol／L的PB。(4)PBS的配制：称取NaCl9克及0．2mol／L的PB50毫升，加入1000毫升的容量瓶中，最后加去离子水至1000毫升，充分摇匀。3、10％中性缓冲福尔马林溶液福尔马林500毫升溶于4500毫升0．1mol／LpH7．3的eBe

7、e。4、铁明矾苏木素染液甲液：10％苏木素无水酒精溶液20毫升加入去离子水180毫升，再加入碘酸钠0．4克。10乙液：4％铁明矾水溶液200毫升。临用前将两液等量混合使用。．5、氨银乙醇液20％硝酸银水溶液6毫升中加入4毫升无水乙醇。逐滴加入浓氨水，立即呈现乳白色沉淀，继续逐滴加入浓氨水至沉淀刚好溶解，再加浓氨水1滴，过滤后置于棕色瓶中避光保存备用。㈢仪器设备BP3100S型电子天平，VT-1300-U超净工