化学去细胞异种神经复合ngf修复神经缺损的早期神经电生理研究

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1、化学去细胞异种神经复合NGF修复神经缺损的早期神经电生理研宄郝增涛温树正（内蒙古医科大学第二附属医院手外二科内蒙古呼和浩特010030）【摘要】FI的：通过化学萃取方法处理兔胫神经，并移植于wistar大鼠坐骨神经缺损处，观察大鼠早期神经电生理恢复情况。方法：选取成年口本人耳白兔5只作为祌经供体，切取双侧胫祌经各3cm,经化学方法制成去细胞祌经基膜管，其屮15段用4500U/ml的NGF溶液4°C浸泡24小时；另15段置于无菌PBS缓冲液中4°C保存备用；选取witar大鼠45只，根据移植物的不同，将Wistar大鼠随机分为3

2、组，每组15只：实验组（A组）：去细胞异种神经基膜管复合NGF移植组、对照组I（B组）：去细胞异种神经棊膜管移植组、对照组n（C组）：白体神经移植组。分笼喂养，术后1个月行祌经电生理检测，包括胫后肌群运动诱发电位，再生祌经的传导速度。结果：刺激移植段近侧祌经，均在人鼠胫后肌群记录到运动诱发电位，神经传导速度为平均为A组21.16±2.31m/s,B组为13.37±1.89m/s,C组为21.43±2.18m/s，A组与C组比较无统计学意义（P〉0.05）,A组与B组比较差异有显著性（P

3、<0.05）,说明神经恢复效果优于B组。结论：化学去细胞异种神经修复大鼠坐骨神经缺损，术后1个月，复合NGF的去细胞祌经基膜管运动传导功能恢复优于单纯去细胞祌经基膜管，效果更加接近于自体神经移植。【关键词】鼠坐骨神经；NGF；异种神经移植；神经电生理【屮图分类号】R741【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2015）16-0128-03选取理想的神经移植替代物，成功修复周围神经缺损已是FI前临床的研宄热点，目前研宂表明：同种异体的去细胞祌经基膜管可以为人鼠坐骨祌经再生提供一个良好的再生通道，而本实验研究采用异种神经

4、基膜管复合NGF桥接周围祌经缺损，早期观察大鼠坐骨神经再生的神经电生理恢复情况，取得了满意结果。1.材料与方法1.1去细胞异种神经基膜管的制备5%盐酸氯胺酮（0.25g/kg）耳缘静脉注射麻醉，取兔小腿后内侧入路显露胫神经，剪取直径约1.5mm的胫神经4cm，按下述方法进行处理[1]:（1）蒸馏水浸浴7小时，换水2次；（2）震荡器中（150转/分）30%TritonX-100溶液消化12小吋；（3）蒸馏水浸浴1小吋；（4）震荡器中（150转/分）4.0%脱氧胆酸钠溶液消化24小吋，重复以上步骤1次，蒸馏水清洗后将处理好的神经放

5、于无菌PBS缓冲液（PH7.2）中，5.4°C冰箱内保存备用。1.2NGF（鼠神经生长因子）与去细胞神经基膜管的复合将制备好的去细胞神经基膜管随机选15段，每段lcm长，放置在由武汉海特生物制药有限公司提供的注射用鼠神经生长因子（4500U/ml）溶液中，4°C下浸泡24〜48小时。[2]1.3神经移植过程用5%盐酸氯胺酮（0.1g/kg）腹腔注射，麻醉剂量约0.7ml。人鼠取俯卧位剪去右侧臀部鼠毛，5%碘洒消毒、75%洒精脱碘后，作大鼠右侧臀部至大腿的后外侧弧形切U长约2cm，在放大10倍的手术显微镜下切开皮肤，从臀部肌间隙

6、暴露右侧坐骨神经，在距坐骨神经起始部lcm以远处切断长约10mm,分别行实验组去细胞异种神经基膜管复合NGF移植（A）、对照组I去细胞异种神经基膜管移植（B）、对照组II自体神经移植（C），用11-0显微缝线4针等间距缝合神经外膜，逐层缝合臀部肌肉、皮肤，术后每组动物分笼喂养，术后1个月吋行神经电生理观察。1.4胫后肌群运动诱发电位及神经传导速度检测采用丹发DanecNeuromatic2000C肌电图仪测量人鼠腔骨后肌群运动诱发电位。方法：动物处死前用5%盐酸氯胺酮（O.lg/kg）腹腔注射，麻醉剂量约0.7ml。暴露移植段

7、神经及胫骨后肌群，以及对侧正常坐骨神经，刺激电极置于移植段近侧约2mm处，记录电极置于胫骨后肌群深约4mm，刺激参数为0.8〜1.5mA、0.1ms、l.OHZo地线夹在足底部，每只动物刺激两次，待屏幕显不图形稳定后保存记录，同样刺激对侧正常坐骨神经，并保存记录。将三组最后所得的潜伏期吋限与两刺激电极之间的距离进行计算得出神经传导速度，进行统计学分析。如图1.2.3所示。3.讨论周围神经再生过程中首先是雪旺氏细胞附着在基底膜上，以形成Buengner氏细胞带，近端再生轴突通过Buengner氏细胞带延伸到终末器官，恢复其功能。

8、而神经缺损修复的关键点就是提供合适的神经支架供雪旺氏细胞附着，从而完成神经再生的过程。0前自体神经移植仍是历史最悠久也是最可靠的周围神经缺损的修复方法，是修复神经缺损的金标准。但常常会增加手术创伤，造成供区功能障碍。而各种合成材料或是肌肉、静脉等生物材料均因其生物相容性或结构