洋葱多糖不同提取工艺的提取效果研究

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1、洋葱多糖不同提取工艺的提取效果研究作者:张锋伦吴素玲孙晓明张卫明【摘要】目的比较不同提取方法对洋葱中多糖的提取效果。方法采用热水浸提法、微波辅助冻融法和超声波法从新鲜洋葱和洋葱皮中提取多糖,用DNS法测定多糖含量。结果以葡萄糖为标准品,采用DNS法测定多糖含量是可行的,平均回收率达到了98.5%,RSD为2.65%。不管是新鲜洋葱肉质部分还是洋葱皮干粉,微波辅助冻融法提取的多糖的得率最高,超声波法提取的多糖的含量最高,其中微波辅助冻融法提取洋葱皮中多糖得率为3.58%(含量为63.9%);肉质部分多糖得率为3.15%(含量为62.0%)。结论微波辅助冻融法是提取洋葱多糖较

2、为合适的方法,该法提取洋葱多糖得率高,且多糖含量也较高。【关键词】洋葱多糖微波超声波Abstract:ObjectiveToparetheeffectsofdifferentextractionmethodsonextractionofthepolysaccharidesfromonion.MethodsPolysaccharidesfreshonionandonionskinbyhotethod,microethodandultrasonicethod.ThecontentofpolysaccharidesinedbyDNSmethod.ResultsUnderthec

3、onditionthattheglucoseedasstandard,itinethecontentofpolysaccharidesinonionbyDNSmethod;theaveragerecoveryratereached98.5%icroost,andthecontentofpolysaccharicleobtainedbyutrasonicost.Theyieldofpolysacchalidesobtainedbymicroethodisanappropriatemethodforextractingpolysaccharidesfromonion.Thep

4、olysaccharidesobtainedbymicroethod,anditsyieldandcontentost.Keyl蒸馏水,用组织破碎机破碎,用200ml蒸馏水分多次冲洗,放入90℃恒温水浴锅中加热提取,时间为40min,过滤,残渣加入500ml蒸馏水重复提取3次。合并滤液,备用。2.1.2微波辅助冻融法取500g新鲜洋葱(去皮),切分成细小的碎块,加入300ml蒸馏水,用组织破碎机破碎后取出,用200ml蒸馏水分多次冲洗,置于冰箱中(约-20℃)冷冻12h,取出后用微波间歇处理40min(每隔5min停止一次,10min/次)后,过滤。残渣加入500ml蒸馏

5、水,重复提取3次,合并滤液,备用。2.1.3超声波提取法取500g新鲜洋葱(去皮),切分成细小的碎块,加入300ml蒸馏水,用组织破碎机破碎后取出,用200ml蒸馏水分多次冲洗。置于超声波细胞破碎仪中,超声处理50min(工作时间30s,间歇时间5s,功率500l蒸馏水重复处理3次。合并滤液,备用。2.2洋葱皮中多糖的提取分别取干洋葱皮粉末10g,加入蒸馏水200ml,室温浸泡2h。按洋葱肉质部分方法同法提取。以上滤液分别减压浓缩至约150ml,sevage法(氯仿-正丁醇=4∶1)去蛋白,加乙醇使含醇量达80%,放置24h,离心,沉淀分别用无水乙醇,丙酮洗涤,抽干,干燥

6、,即得洋葱多糖粗品。并计算粗多糖得率。结果见表1。表1不同提取工艺洋葱粗多糖得率比较2.3不同提取工艺的洋葱多糖含量测定[11~13]2.3.1对照品及样品溶液的制备对照品溶液的制备:精密称定105℃干燥至恒重的葡萄糖50mg,置50ml容量瓶中,蒸馏水溶解,稀释至刻度,即得0.1%葡萄糖标准液。样品溶液的制备:精密称取上述不同工艺制备的粗多糖各0.1g,放入大试管中,加入10ml6mol/L盐酸和15ml蒸馏水,混匀。在沸水浴中加热水解30min,用碘化钾-碘溶液检查水解程度,若已水解完全,则不呈现蓝色。立即冷却,加入酚酞指示剂1滴,以10%氢氧化钠中和至溶液呈微红色,

7、过滤,滤液定容至100ml,备用。2.3.2检测波长的确定分别取对照品溶液和样品溶液各1.0ml,各加蒸馏水使均达到2ml,并以2ml蒸馏水做空白对照,再分别加入1.5mlDNS试剂,在沸水浴中加热5min显色,立即用流动的冷水冲洗使其迅速冷却,再各加入20ml蒸馏水,混匀后,在400~600nm扫描,样品和对照品溶液均在520nm处有最大吸收,因此确定520nm为检测波长。2.3.3标准曲线的绘制分别精密吸“2.3.1”项下的标准液0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.4,1.6ml于9只大试管中,各加

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