真皮多能干细胞复合聚乳酸支架修复关节软骨全层缺损的实验研究

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1、真皮多能干细胞复合聚乳酸支架修复关节软骨全层缺损的实验研究.L.编辑。作者：夏亚一，鲁茂森，袁凌伟，邢帅，汪静，王翠芳，汉华，沈海丽【摘要】［目的］探讨真皮多能干细胞在软骨缺损修复中的可行性，为扩大软骨缺损修复中种子细胞的选择提供实验依据。［方法］以新生青紫蓝兔为研究对象，机械法直接分离得到真皮组织，采用酶消化法获取细胞，利用干细胞贴壁粘附生长的特性获取高克隆细胞群，并进行传代培养。使细胞浓度达到1×106/ml与聚乳酸支架材料共培养一周后植入兔膝关节软骨全层缺损处，用3～5个月龄青紫蓝兔30只，60个关节，随机分为真皮多能干细胞/聚乳酸支架材料、

2、聚乳酸支架材料、空白对照三组，每组20个关节，于术后12周空气栓塞处死实验兔，对修复组织进行取材，行HE、甲苯胺蓝染色，根据软骨缺损修复情况进行大体、组织学评分，并进行统计学分析，比较各组的评分差异是否具有统计学意义。［结果］大体及组织学观察显示，真皮干细胞/支架材料实验组修复组织表面光滑、呈透明样,与周围软骨及软骨下骨整合良好，而聚乳酸支架材料组有少许透明样软骨,主要以纤维软骨修复,空白对照组则表面有缺损,以纤维软骨修复。大体及组织学观察后进行统计学评分分析，显示A组修复效果最优、优于B、C组（P<0.05），B组优于C组（P<0.0

3、5）［结论］真皮多能干细胞修复关节软骨缺损效果明显，恢复正常关节软骨结构，可作为组织工程化软骨种子细胞之一。【关键词】真皮多能干细胞;聚乳酸;关节软骨；全层缺损;软骨修复Abstract:［Objective］Toinvestigatethefeasibilityofthedermalpluripotentstemcellsintherepairingofcartilagedefects.Itedtoprovideexperimentalbasisinviealtissuedirectlyisolatedthroughmechanicalmetho

4、dandcellsthroughenzymaticdigestioncellslplantedintofull-thicknessarticularcartilagedefectsofrabbits.Thirtycyanoticbluerabbit(60joints)forabout3～5monthslydividedintothreegroups:dermalpluripotentstemcell/scaffoldpolylacticacidingroupA,polylacticacidscaffoldingroupB,controlsingro

5、upC.Tbolizationat12ade,andanalyzedbystatistics.Theparisonofscoredifferencebetedstatistically.［Result］GrossandhistologicalobservationdemonstratedthatingroupAorganizationshadsmoothsurface,appearedtransparent,goodintegrationuchproportion.ThesurfaceofgroupCshoedefects,mainlycharac

6、terizedbyfibrouscartilagerepair.Aftergrossandhistologicalobservationsstatisticsscoreanalysised.Resultsshoostoptimal(P<0.05),groupBalmultipotentstemcellsforrepairingarticularcartilagedefectsobtainedgoodresult.Itisfeasibletobeusedastheseedcellsfortissue-engineeredcartilage.Ke

7、yalpluripotentstemcells；polylacticacid;articularcartilage;full-thicknessdefect;cartilagerepairing关节软骨是滑膜关节重要的结构和功能单位。由于软骨组织本身缺乏血管，及修复损伤和缺损的未分化细胞，软骨细胞包埋于胶原-蛋白多糖基质中，限制了细胞的增殖和迁移能力，所以一旦关节软骨发生损伤，难以自身修复。若治疗不及时或不恰当，难以形成正常的关节软骨，就无法满足正常关节的功能需求，将会导致严重的关节功能障碍［1］。种子细胞选择是关节软骨缺损修复的重点内容。目前，在

8、软骨组织工程研究中应用的种子细胞主要是软骨细胞和骨髓间充质干细胞，自体软骨细胞在体外和体内移植研究中均证实具有可靠的修复软