复合自体骨髓基质干细胞(bmscs)的关节软骨细胞外基质(sacecm)取向支架修复羊膝关节全层软骨缺损的实验的的研究

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1、分别以：空白(缺损内未植入任何组织物)；单纯ACECM取向支架植入修复；BMSCS+ACECM取向支架植入修复三种方式治疗，并分别于术后3个月、6个月取材进行大体观察，组织学检查，病理评分和力学检测。结果：(1)由髂骨抽取的骨髓血分离、培养、扩增出来的骨髓基质干细胞向成骨方向诱导，经茜素红染色为阳性；向成脂肪诱导，经油红“O”染色为阳性；向软骨诱导，经蕃红“O”、甲苯胺蓝、Ⅱ型胶原免疫组化染色均为阳性，证实扩增的细胞为具有多向分化能力的骨髓基质干细胞。(2)骨髓基质干细胞与支架复合后继续培养7天，做死活细胞染色，活细胞占95％以上。扫描电镜观察：细胞在取向支架上体外培养一周后见细胞大部分展

2、开呈多角形，与支架粘附良好，有大量细胞基质的分泌，且广泛分布到支架内部，沿着支架的孔道分布排列成柱状结构，其横截面见细胞呈圆球形，均匀分布在支架孔道内。(3)BMSCs复合ACECM取向支架修复羊负重区关节面软骨缺损，从大体观察、组织学、力学等实验结果进行比较，单因素统计学分析，发现各组均有不同程度的组织修复，其中以BMSCs复合ACECM取向支架组效果最优，且与其它组比较有统计学意义。结论：(1)体外成功培养了表型稳定的羊骨髓基质干细胞。(2)骨髓基质干细胞在ACECM取向支架内生长状态良好，具有较好的亲和力，并能延孔道分化增殖，细胞在支架内的分布方式能按正常软骨细胞的方式分布生长。(3

3、)利用ECM取向支架复合自体BMSCs，成功的构建了组织工程化软骨，并具有正常软骨组织的组织学和生化特性，较好的修复了大动物受损的关节软骨。关键词：组织工程骨髓基质干细胞关节软骨细胞外基质取向支架2AnexperimentalstudyofautologousBonemarrowmesenchymalstemcellsinarticularcartilageextracellularmatrixtorepairfull-thicknessdefectsoffemoralweight-bearingarticularcartilageinthegoatMasterdegreecandidat

4、e：MaNingSupervisor：ProfessorZhangWeiguoVice—supervisor：AcademicianLuShibiProfessorGuoQuanyiMajor：OrthopaedicAbstractBackground：Withthedevelopmentandadvancementofmedicalscience，articularcartilagelesionintheearlydiagnosisandffeatmentbecomeanimportantissue,whileitisveryhardforarticularcartilagetospon

5、taneouslyhealwithoutnervesandbloodorlymphaticvessels．However,fullthicknessosteochondralinjuryundergoesafibrocartilaginOUSrepairthatdoesnotpossessthesamebiological，biochemical，orbiomechanicalcharacteristicsofnativehyalinecartilage．Thisfibrocartilagenousrepairultimatelyfailedundernormalstresses，lead

6、ingtodegenerativearthritis．Therefore，malTOWstimulationtechniques(drilling，arthroplasty,microfracture)，whichwereusedinclinicaltreatment，resultinfibro-cartilagerepairtissuethatrapidlydeterioratesifsubjectedtosheerorcompressiveloads．Asanewbranchofscience，tissueengineeringhasbecometheinternationalfore

7、frontofbiomedicaldomain，andhasbeenpaidmoreandmoreattentionbyresearchers．Engineeringprinciplesandlifesciencestechnologyhasbeenused．Seedcellswereintegratedtoacarriermadebysuitablebiodegradablematerialsandbeencultur