bmscs与软骨细胞共培养复合bmg修复关节软骨缺损的实验研究

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1、中图分类号UDCR684610硕士学位论文学校代码密级10533BMSCs与软骨细胞共培养复合BMG修复关节软骨缺损的实验研究ExperimemalStudyonRepairingArticularCartilageDefectsUsingtheCoculturesofBMSCsandAllogeneicCostalCartilageCellsCombinedwithBoneMatrixGelatin作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：陈波临床医学外科学(骨科)中南大学湘雅医学院附属海口医院张寿教授

2、论文答辩日期兰”二_。?-答辩委员会主席中南大学一豸一4．--一---a如：F五月血月原创性声明fIIIIIllEEIlUlIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIlllY2422538本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：目期：趔L年兰月卫曰学

3、位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：监一导师签名：白期：业年』月尘日BMSCs与软骨细胞共培养复合BMG修复关节软骨缺损的实验研究摘要：目的：探讨BMSCs与同种异体肋软骨细胞共培养及复合自体“双相"

4、骨基质明胶(BMG)修复关节软骨缺损的可行性。方法：1、贴壁离心法分离兔BMSCs，酶消化法结合组织块法获取肋软骨细胞，体外扩增，形态学观察，绘制生长曲线、检测BMSCs的表型，组织学鉴定软骨细胞。2、取两种细胞的P2代随机分为三组：A为共培养组，B为高浓度单纯软骨细胞组，C为低浓度单纯软骨细胞组，体外培养2周后比较各组培养液中GAG含量的差异。3、改良的Urist法制备兔自体“双相”BMG支架，体外与共培养细胞复合培养3天行电镜观察。4、制备36只实验兔膝关节软骨缺损模型，随机分为三组：实验组植入共培养细胞一BMG复

5、合体，对照组植入单纯BMG支架，空白组不作特殊处理。术后1、2、3个月取材行大体、组织学观察并评分行统计学分析。结果：1、贴壁离心法分离的BMSCs生长良好，酶消化法结合组织块法获得的肋软骨细胞生物活性良好。2、2周后A组培养液的GAG含量明显多于B、C组，差异有统计学意义(P

6、．05)，表明其修复效果优于其它两组。结论：BMSCs与同种异体肋软骨细胞共培养，可被诱导分化为软骨细胞，未出现明显排斥反应，减少了软骨细胞的用量；共培养细胞与自体“双相”BMG复合可有效地将关节软骨缺损修复。图42幅，表5个，参考文献74篇。关键词：软骨缺损；组织工程；BMSCs；软骨细胞：共培养分类号：610ExperimentalStudyonRepairingArticularCartilageDefectsUsingtheCocultureofBMSCsandAllogeneicCostalCartilage

7、CellsCombinedwithBoneMatrixGelat：inAbstract：Objective：Thestudyaimstoinvestigatethefeasibilityofrepairingarticularcartilagedefectsusingthecocultureofbonemesenchymalstemcells(BMSCs)andallogeneiccostalcartilagecellscombinedwithautologous‘‘two-phase’’bonematrixgelat

8、in(BMG)．Methods：1，RabbitBMSCswereisolatedbythemethodofadherentcentrifugation，andthecostalcartilagecellswereobtainedwiththemethodsofenzymedigestionandtissueexplant，fol