自体软骨细胞和骨髓基质细胞修复关节软骨缺损的对比研究

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1、中山大学硕士学位论文自体软骨细胞和骨髓基质细胞修复关节软骨缺损的对比研究姓名：秦骥申请学位级别：硕士专业：骨科指导教师：蔡道章2003.5.28自体软骨细胞和骨髓基质细胞修复关节软骨缺损的对比研究中文奠要自体软骨细胞和骨髓基质细胞对关节软骨缺损修复的对比研究中山大学附属第三医院骨科研究生：秦骥导师：蔡道章教授摘要I瑚；缚日的l关节软骨损伤是常见病，由于关节软骨自身修复能力有限，大面＼y’积缺损仅有局部内向性生长等修复表现，创面不能愈合，而关节软骨损伤得不到及时有效得修复，关节将不可避免地发生骨关节炎，影响患者的生活质量，严重者使关节丧失功能，因此

2、，促进关节软骨损伤修复已成为国内外研究地热点。有些方法己应用于临床，但是临床效果不佳。组织工程的发展为关节软骨的修复带来了额的希望。许多学者对构建组织工程化软骨的种子细胞、生物支架材料和生物物理环境进行了大量的研究，取得了一定的成果，但至今尚未找到构建关节软骨的理想方法，就种子细胞而言，目前常用的有骨髓基质细胞和软骨细胞，据文献报道两种细胞各有优缺点，但哪种细胞更具优势尚待研究，为此，我们对两种细胞进行对比研究，为种子细胞的合理选择提供依据。f》粼蠢《I《瓣用24只月龄为4．6个月的新西兰大白兔作为实验对象，随机分两组，一组作为骨髓基质细胞实验组

3、12只，另一组作为软骨细胞实验组12只。先取软骨细胞和骨髓基质细胞进行体外培养扩增，获取足够数量的细胞，种植到I型胶原海绵上立体培养2周后，经病理切片证实细胞生长良好，分布均匀后，再把细胞和I型胶原海绵复合体移植到自体新西兰大白兔一侧膝关节股骨下段的软骨滑车上，另一侧关节作空白和纯I型胶原海绵对照组。这样，24只新西兰大白兔膝关节最终形成4个观察组：(1)、空白对照组：24个。(2)、I型胶原海绵对照自体软骨细胞和骨髓基质细胞修复关节软骨缺损的对比研究中文奠要组：24个。(3)、软骨细胞I型胶原海绵复合体实验组：24个。(4)、骨髓基质细胞I型胶

4、原海绵复合体实验组24个。分别于一个月、两个月、三个月处死，在观察期间内，注意观察关节活动度，关节液及关节软骨修复情况，并对修复组织作病理切片HE染色和组织化学法染色，对第三个月标本电镜观察，来确定修复组织是否是透明关节软骨，组织学评分以及统计学分析进一步量化修复组织的性质。结果：il、关节活动度：除一例有关节腔内粘连外，其余得到观察的关节活动不受限制，运动自如。看不出明显差别，可能与兔子活动姿势有关。2、关节液：关节软骨缺损被修复的关节液量少、粘稠，透明，为正常关节液；有缺损存在的关节腔内关节液较多，稀薄、少许血性，但无明显积液，可能因为兔子此

5、处的关节软骨为非负重区的缘故吧。3、相比之下，骨髓基质细胞获取更容易，创伤小，成活机会大；而软骨细胞创伤较大，还需要一个消化过程，过程比较复杂；两种子细胞在体外扩增速度快，都比较容易成活，都能满足组织工程的需要。4、I型胶原海绵具有良好组织相容性，是一个比较理想的天然细胞载体，骨髓基质细胞与I型胶原海绵组织相容性好，软骨细胞比骨髓基质细胞更好，可能因为软骨细胞本来生存环境为胶原缘故吧。5、空白和I型胶原海绵对照组没有完成关节软骨修复，而骨髓基质细胞和软骨细胞实验组都得到修复，一个月后标本见骨髓基质细胞组修复较慢，软骨细胞修复组较好；二个月后标本大

6、体所见无差别，甲苯胺兰异染程度可见软骨细胞稍比骨髓基质细胞组好，三个月后看不出差别，但与正常关节软骨相比仍有区别，也就是说声观察期间内没有达到完全修复，但两种修复方法对关节软骨都能达到修复的目的，两者无根本差别。第三个月标本见修复组织是透明软骨。6、电镜结果显示：第三个月的修复组织无论是细胞还是基质，都符合透明关节软骨的生物学特性。两实验组之间无显著差异。j缮鹾鹣自体软骨细胞和骨髓基质细胞修复关节软骨缺损的对比研究rp文冀要1、骨髓基质细胞获取比软骨细胞更容易，两者都有很强的体外扩增能力，都能在I型胶原海绵内很好生长，相比之下，软骨细胞更好；I型

7、胶原海绵具有良好组织相容性，是一个比较理想天然细胞载体。2、两实验组在第一个月内的修复组织有差异，二、三个月标本上无明显区别，两者都能达到修复关节软骨的效果，从第三个月标本电镜结果显示：修复组织为透明软骨，两者差异不明显，与正常软骨差别不明显。修复后关节恢复正常功能，未修复的关节有少量血性关节积液。关键词：自做软骨细胞j骨髓基质细胞j关节软骨j修毁对}‰皂堡墼量塑丝塑量塑茎堕塑堕堡堡茎羔墼量堡塑塑型些堑壅墓塞塑墨ContrastStudyofCulturedAutologousChondroeytesandBoneMarrowStromalCel

8、lsonRepairofChondralDefectsPostgraduate?QinJiSupervisor：ProfCaiDaozh