脂肪干细胞复合sdf1双层plga支架修复软骨缺损地研究

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1、万方数据JIllllIllllllllllIIY2743857Author’ssignature:Supervisor’ssignature:Thesisreviewer1:Thesisreviewer2:Thesisreviewer3:Thesisreviewer4.Thesisreviewer5:Chair:幽Shi:g坠i(Committeeoforaldefence)Committeeman1:CHENWei.shanCommitteeman2:TAOHui.minCommitteeman3:)堡Zh垒Q:mi旦gCommitteeman4:Committeeman5:圣H盟Li坠

2、:!Q塾gDateoforaldefence:2014.12.2万方数据浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得浙逛太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:\乏磊嗣签字日期:纱、沪年,五月力日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解浙选太堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权逝

3、塑太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:导师签名:签字日期:v1抄年7Z月2/日签字日期:1咿l“年C>月三.日万方数据浙江人学博上学位论文致谢致谢三年博士学>--j期间,在恩师潘志军教授的悉心指导和严格要求下我逐步完成了本研究课题的选题、设计、实施以及论文的撰写。值此论文完成之际衷心感谢我尊敬的导师在科研素质、学风培养及生活方面对我的教诲、关怀和帮助!导师严谨的治学态度、敏锐的科学洞察力、渊博的知识、忘我的工作精神深深激励着我,并将使我终生受益。衷心感谢

4、浙医二院骨外科的各位老师、全体医生护士在我学习、工作、生活中所给予的无限关怀和谆谆教诲,在此表示深深的感谢和敬意。衷心感谢曾经给予我帮助的同学、师兄师弟、朋友。最后我要感谢我的家人,是他们的巨大支持和无私奉献使我能顺利完成学业。再次对所有关心帮助过我的人表示深深的谢意,我将永志不忘!万方数据浙汀人学博上学位论文文摘要脂肪干细胞复合SDF.1/双层PLGA支架修复软骨缺损的研究浙江大学医学院博士研究生导师摘要外科学(骨外科)高翔潘志军教授关节软骨在关节负重和运动中起着十分重要的作用,同时它也是关节内骨折中最易损伤的结构。成熟的软骨细胞特别是透明软骨细胞再生能力较弱,一旦软骨细胞受到破坏将加速

5、软骨细胞凋亡的发生,形成局部软骨缺损,易出现骨性关节炎,引发疼痛、关节畸形及残疾,严重影响患者的健康和生活。目前临床上采用了多种方法治疗软骨缺损,但治疗效果尤其是长期效果不稳定。近年来,组织工程技术的发展,为解决软骨损伤的修复这一难题提供了可能性,来源于各种组织的间充质干细胞被用于组织工程修复的种子细胞,其中脂肪来源的问充质干细胞(ADSCs)因其来源广泛、在机体内性能和含量稳定、对机体损伤很小、培养条件较简单、增殖能力较强等特点,日益受到学者们的关注。干细胞被证实可向机体受损部位迁移,这种迁移活动与多种趋化因子密切相关。基质细胞衍生因子.1(Stromalcell.derivedfact

6、or.1,SDF.1)是由骨髓基质细胞及其它相关的间皮细胞和上皮细胞分泌的一种趋化蛋白,是已知的干细胞迁移的主要趋化因子,在干细胞的动员和归巢起了关键性的作用。SDF.1的生物学功能复杂,广泛参与细胞发育、调控干细胞的迁移并与恶性肿瘤的生长转移密切相关。最近的研究显示,与SDF.1野生型小鼠相比,SDF.1牛小鼠胚胎的肱骨长度明显短缩,组织学分析表明,SDF.1在肥大前期和肥大期的软骨细胞内均有表达,说明SDF.1在调控软骨细胞分化成熟过程中也扮演着十分重要的作用。我们认为,SDF.1的上述对于细胞诱导趋化及对软骨细胞分化调控的作用使得其在软骨缺损再生修复中可能存在有广阔的应用空万方数据浙

7、江大学博上学位论文文摘要问,因此,我们设计了此项研究。本课题拟将SDF.1整合至PLGA支架中,使其在体内局部释放,然后复合脂肪来源的干细胞修复软骨缺损,SDF.1可以使移植和体内来源的干细胞迁移至缺损部位,从而促进软骨再生,同时采用荧光标记示踪移植的ADSCs。实验分为三部分:(1)兔ADSCs的培养、鉴定及SDF一1对ADSCs的增殖、分化作用;(2)双层PLGA支架制作及SDF.1/PLGA支架对ADSCs增殖、分

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