微波消融联合瘤体内注射树突状细胞治疗小鼠骨髓瘤的实验研究

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1、微波消融联合瘤体内注射树突状细胞治疗小鼠骨髓瘤的实验研究作者：顾玉明，程隆，周青，许伟，徐浩，祖茂衡【摘要】目的评价微波消融后瘤体内注射树突状细胞对荷瘤小鼠免疫功能的影响以及治疗肿瘤的效果。方法建立BALB/C小鼠皮下骨髓瘤模型。微波消融肿瘤后瘤体内注射同种异体树突状细胞，24h后于注射树突状细胞相同位置注射肿瘤坏死因子-α（TNF-α），分别于治疗前1天、治疗后第3、5、7天测量肿瘤体积，第7天流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群和肿瘤切片组织病理。与对照组比较免疫功能和肿瘤体积的变化。结果联合治疗小鼠的外周血CD8+淋巴细胞比例

2、比对照组和消融组增高(P<0.05)，并且肿瘤组织病理切片可见T淋巴细胞浸润增加；治疗组肿瘤体积比对照组明显减小(P<0.05)。结论恶性肿瘤经微波热消融后可以暴露肿瘤抗原，联合体外培养的功能完善的树突状细胞可以有效建立肿瘤细胞免疫应答，并有效抑制肿瘤生长。【关键词】恶性肿瘤；微波消融；树突状细胞　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofmicrooralinjectionofdendriticcellsontheimmunefunctionofBALB/Cmiceyelo

3、maandtoevaluatetheefficacyinthetumortreatment.MethodsBALB/Cmousemyelomamodelicroogeneousvariantdendriticcellsor.24hourslater,tumornecrosisfactor-α(TNF-α)esiteasthedendriticcellinjection.Thetumormasseasuredonedaybeforeand3,5and7daysaftertreatment,respectively.Onthe7thd

4、ay,Tcellsubgroupofperipheralbloodinedbyfloetryandtumorsectionsmuneresponseandtumorsizephocytesintheperipheralbloodincreased(P<0.05)inthebinedtreatmentgroupasparedtothecontrolgroupandtheablationgroup,phocytictissue;thetumorsizeinthetreatmentgroupsarkedlyreduced(P<

5、;0.05)incontrasttothecontrolgroup.ConclusionThetumorantigenofmalignanttumorcanberevealedbymicroalablation.Inbinationorcellularimmunologicresponsecouldbeestablishedandtumorgroalignanttumor;microl(细胞数为2×106)，2周后肿瘤生长直径达到≥1cm，采用亿高医疗公司ECO-100多功能微波治疗仪（冷循环微波刀）对2个治疗组小鼠行麻醉下以输出

6、功率20in；联合组小鼠在微波消融治疗后6h于肿瘤局部注射参照　　2.3肿瘤组织标本大体和病理观察　　肿瘤组织大体变化表现为：对照组肿瘤呈类球形，表面凹凸不平有小结节，切面可见肿瘤呈鱼肉状，有肿瘤间质分隔，坏死鲜见；消融组肿瘤体积较对照组减小，微波消融区收缩塌陷，切面可见微波消融区大片坏死；联合组的肿瘤体积和微波消融区变化同消融组相似，切面除了消融区大片坏死还可见肿瘤边缘的小灶状坏死。苏木精-伊红染色见：对照组（图1）小鼠肿瘤生长活跃，肿瘤血管丰富，肿瘤细胞大，多边形，大核、异形核，染色质丰富，巢状生长，可见少量点、片状坏死区，淋

7、巴细胞、单核细胞鲜见；消融组（图2）肿瘤消融区大片无结构坏死区，坏死周围肿瘤组织变化不大，同对照组；联合组（图3、4）消融区亦呈现大片无结构坏死区，消融针道周围水肿带，肿瘤组织中可见小片状红染坏死，肿瘤组织、间质和水肿带中可见淋巴细胞浸润，肿瘤血管较对照组和消融组变细、减少。　　3讨论　　微波消融对实体肿瘤的治疗作用不仅表现在其使肿瘤组织局部变性坏死，而且能将局部变性坏死的肿瘤组织作为瘤苗，刺激机体免疫系统加速Th1/Th2漂移的逆转，增强机体免疫功能。其改善宿主免疫功能的可能机制包括：①热消融治疗后肿瘤变性坏死，在一定程度上减轻

8、瘤负荷,消除体内肿瘤免疫抑制因子的来源，使肿瘤和宿主的优势比发生改变，利于宿主免疫功能的恢复。②加温引起的炎症反应造成局部组织内单核细胞和淋巴细胞浸润，导致细胞介导的免疫反应增强。③热消融治疗后肿瘤细胞经热疗原位灭活仍留在体内，具有留置瘤苗的作用。