致敏树突状细胞联合细胞毒性t细胞治疗恶性胶质瘤的实验研究

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1、贵阳中医学院硕士学位论文分类号UDC密级学校代码!Q鱼鱼呈学位论文致敏树突状细胞联合细胞毒性T细胞治疗恶性胶质瘤的实验研究姓名李争争指导老师姓名：扬垫塾援申请学位级别：童些堂僮亟±专业名称：虫酉医结金!晦废论文提交E11tll：圣Q!墨生鱼旦论文答辩日期：垒Q!圣生墨旦学位授予单位和El期：．贵I旦虫医堂随至Q】墨生鱼目贵阳中医学院硕士学位论文贵阳中医学院硕士学位论文相关声明原创性声明本文声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表论文中撰写过的研究成果，也不包含为

2、获得贵阳中医学院或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确说明。作者：冬奄§日期：≯，；年6月／日关于学位论文使用授权说明本文了解贵阳中医学院有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其他手段保存学位论文；学校可根据国家或贵州省有关部门规定送交学位论文。．作者签名：存掳导师签名：期：缈弓年石月／日贵阳中医学院硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··l英文摘要⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯一．⋯．．⋯⋯

3、⋯⋯⋯．．⋯．．⋯⋯⋯⋯·2前言．．．．．．．．．．．．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．．．．3刖吾⋯⋯⋯．．．．．·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯o1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·52方法⋯．⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯．．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯73结果⋯⋯．．．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．儿4讨论⋯⋯⋯⋯⋯．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯165结论⋯⋯⋯⋯⋯．．．：⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯．．20全文总结与展望(单独成页的)．．：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·22附录一缩略

4、语表⋯⋯⋯．．⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯．26附录二综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．27附录三实验附图⋯⋯⋯．．．．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯41附录四致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．51贵阳中医学院硕士学位论文摘要目的：探讨致敏树突状细胞(Dendriticcells，DC)联合细胞毒性T细胞(cytotoxicTlymphocytes，CTL)对恶性胶质瘤的治疗作用。方法：分离培养SD大鼠骨髓来源的DC并用C6胶质瘤细胞冻融抗原致敏，通过流式细胞仪检测大鼠DC特异性标志OX62的表达情况；培养大鼠脾脏来源的T淋巴细胞，用负载C6

5、细胞抗原的DC诱导T细胞活化为CTL：用CCK-8法检测致敏DC对T淋巴细胞增殖的刺激能力以及CTL对C6胶质瘤细胞的体外杀伤能力。制作SD大鼠颅内C6胶质瘤模型并分为4组：致敏DC治疗组、CTL治疗组、致敏DC联合CTL治疗组和对照组。从建模后第三天开始对大鼠进行免疫治疗，之后每周加强注射一次，共治疗4次。治疗过程中对荷瘤鼠的生存质量进行跟踪评价，第21天行MRI检查计算各组大鼠肿瘤的体积，分析各组大鼠的生存时间和存活率，并取脑组织做病理学检查了解各组治疗方式对肿瘤细胞生长情况的影响。对数据进行统计分析以比较各组件的疗效是否有差异，分析联合致敏DC和CTL治疗恶性

6、胶质瘤的效果。结果：培养的DC经流式细胞仪检测O)【62阳性率在85％以上；致敏的DC能够有效刺激T淋巴细胞增殖，诱导CTL的分化，获得的CTL对C6细胞具有显著的杀伤的作用：联合致敏的DC和CTL治疗的胶质瘤大鼠，MRI测得颅内肿瘤体积明显小于DC治疗组(P

7、达水平有不同程度的下降。结论：致敏DC联合CTL治疗大鼠恶性胶质瘤效果较显著，且疗效优于单独使用DC或CTL治疗组。关键词：胶质瘤，免疫治疗，树突状细胞，细胞毒性T淋巴细胞贵阳中医学院硕士学位论文ABSTRACTObjective：StudytheeffectofpulsedDCscombinedCTLsontreatingratgliomas．Method：DCswereSeparatedfromtheSDratbonemarrowandweresensitizedbyC6cellsfreeze·thawantigen．ThepurityofDCswasdet