四棱豆总黄酮含量的研究

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1、四棱豆总黄酮含量的研究【关键词】四棱豆；,,总黄酮；,,提取工艺；,,含量　　摘要：目的研究了四棱豆总黄酮的提取工艺和含量。方法采用正交实验分析和分光光度法。结果四棱豆总黄酮的最佳提取工艺是水浴温度为85℃，提取时间为6h，提取剂乙醇浓度为80%，并且该提取方法稳定性好，精密度和回收率高；以芦丁为对照品，测得四棱豆根、茎、叶、花、果实、种子和整株的总黄酮含量分别为0.73%，0.93%，2.30%，3.96%，2.88%，3.12%和2.44%。结论该研究为四棱豆的综合开发利用提供了科学依据，具有重要的理论和实践指导意义。　　关键词：四棱豆；总黄酮；提取工艺；含量　　Studyont

2、heFlavonoidContentinents.ResultsTheanalyticalresultshoumextractingconditionsperature85℃,extractingtime6h,extractionreagent80%alcohol.Andthestabilityofthemethodeanaterial,s,leaves,floentofportantguidingsignificanceinboththeoryandpractice.　　Key）下的吸光度，以光波波长为横轴，以吸光度(A)为纵轴，绘制四棱豆（叶）提取液的吸收曲线。结果见图1。　　1

3、.3.2提取方法的正交实验方案在实际操作中，考虑到各种因素之间的影响，因此主要对乙醇的浓度、浸提温度和提取时间三因素四个水平进行正交实验，以便测定不同条件下四棱豆总黄酮的含量。正交实验方案见表1。　　1.3.3标准曲线的制备准确称取芦丁对照品26.80mg，用65%乙醇定容至100ml，即芦丁对照液的浓度为0.2680mg/ml，作为储备液。精确吸取上述储备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml分别放置于5个25ml容量瓶中，分别加入5%NaNO2溶液1.0ml，放置6min后，加入5%Al(NO3)3溶液1.0ml，室温放置6min后，再加入5%NaOH溶液10ml，用65%

4、乙醇溶液定容,摇匀，碱性条件下显色15min后,用1cm比色皿,以试剂空白为参比,于最大吸收波长（500nm）处测定吸光度值，绘制标准曲线（如图2）。所得的标准曲线回追方程为A=6.857・C－0.002，R=0.9994，线性关系良好，并且由此可推导出公式：C=（A+0.002）/6.857。　　1.3.4四棱豆总黄酮的测定方法准确称取四棱豆各器官（根、茎、叶、花、果实和种子）及整株样品各2.0000g，用索氏提取器加最适提取剂（80%乙醇）100ml在85℃水浴温度条件下回流提取6h，冷却后，用80%乙醇定容至100ml，备用。准确移取各样品液2组，每份1ml，置于

5、25ml容量瓶中，其中一组直接以65%乙醇定容至25ml作空白对照；另一组按上述方法进行显色测定。　　图1四棱豆总黄酮的吸收光谱（略）　　图2芦丁样品标准曲线（略）　　1.3.5精密度实验精密称取干燥的四棱豆（叶）粉末6份，2.0000g/份，按1.3.4实验方法测定其吸光度（A）。　　表1因素水平（略）　　1.3.6稳定性实验以四棱豆（叶）提取液为样品液，测定显色液稳定性和提取液稳定性。①显色液稳定性实验：每间隔20min测1次吸光度，共测定6次；②提取液稳定性实验：每5d测定1次，共测定6次。　　1.3.7加样回收率的测定准确移取上述四棱豆（叶）提取液5份，1.0ml/份，分别置

6、于5个25ml的容量瓶中，并且分别加入芦丁标准储备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，即分别加入芦丁对照品0.2680，0.5360，0.8040，1.0720，1.3400mg。然后按上述显色方法进行比色测定。　　2结果与分析　　2.1最大吸收波长由图1可知，四棱豆黄酮提取液硝酸铝显色后稳定的最大吸收峰值在500nm波长处。因此，芦丁标准曲线及四棱豆各样品黄酮的比色测定均在500nm波长处进行。　　2.2正交实验结果与分析准确称取四棱豆（果实）干燥粉末16份，每份2.0000g，分4组，按表2配置方案制备黄酮提取液100ml，并分别取1.0ml黄酮提取液置于25ml容量瓶

7、中，按1.3.3实验的显色方法测定其吸光度。根据表2中R1，R2，R3，R4和R值分析可知，影响总黄酮提取得率的所选因素的主次依次为提取时间→乙醇浓度→水浴温度，提取四棱豆总黄酮的最佳提取工艺为A3B3C3，即水浴温度为85℃，提取时间为6h，乙醇浓度为80%。　　2.3四棱豆不同部位的总黄酮含量比较分别测定四棱豆各器官及整株的吸光度（A值），3份/样品，取吸光度的平均值（）计算各样品总黄酮的百分含量（波长处，并且首次测得四棱豆根、茎、叶、花、果实、种子和