实验总黄酮含量的测定

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1、《有机分析实验讲义》植物中总黄酮的提取与测定黄酮类化合物主要指以2—苯基色原酮为基核的化合物，主要有黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮、花色素、查尔酮等以及它们的衍生物。其主要结构式如图。2•苯基色原酮2-苯蓽苯并吡喃图黄酮类化合物分子结构式黄酮类化合物主要结构类型见表。表黄酮类化合物主要结构类型名称故酮类黄W醇二氣黄銅类二氯黄•W炎：花色索类齿烷-3.4-一醇类双笨吡《类（咄W类〉F碳链郎分结构OOOOXLOH•卒O名称黄烷-3-酵类异班銅类二氢异黄酮类杏珲銅类二氢卉耳酮炎橙酗类::磙格郎分结构A,,,OOVVOOO原理黄酮母核中含有碱性氧原子，一般又多带酚羟基，能和铝离子产生黄色

2、络合物，乂加入亚硝酸钠和氢氧化钠，使在碱性溶液中呈红色，溶液在510nm处有最大吸收，显色反应在60min内稳定。用芦丁作为对照品，用硝酸铝作为黄酮类比色测定的显色剂，吸光度与芦丁的浓度呈线形关系，采用分光光度法对总黄酮进行了含量测定。仪器与试剂新锐T6型紫外可见分光光度计；Explrer型电子天平（0.lmg）。60%的乙醇溶液；5%亚硝酸钠溶液；10%硝酸铝溶液。芦丁标准溶液的配制称量13.2mg芦丁，用60%乙醇定容到25ml容量瓶作为标准溶液。标准曲线的制作准确吸取0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0ml芦丁标准溶液，放入10毫升容量瓶内（写明标记），分别加入2.0、1.6、1

3、.2、0.8、0.4、0ml的60%乙醇溶液；再加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml摇匀，放置6min；加入10%硝酸铝溶液0.5ml,放置6min后；加入4%氢氧化钠溶液4.0ml,加60%乙醇定容，摇匀后，放置15min；（扫描找到最人吸收）在510nm处测定吸光度。用0.0ml作为空白，用芦丁含量的浓度作为横坐标，纵坐标作为一定浓度下所对应的吸光度，作标准曲线。3.6.4总黄酮提取与测定和计算称取0.6—0.8g样品粉末，加入60ml60%乙醇放于100ml圆底烧瓶内，置于水浴锅上，70°C条件下回流提取60miri。过滤、定容于100ml.吸取样品量（根据样品的吸光度调整）1.0ml，放入

4、10毫升容量瓶内（写明标记），用60%乙醇加到2.0ml;加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml摇匀,放置6min;加入10%硝酸铝,溶液0.5ml,放置6min后;加入4%氢氧化钠溶液4.0ml,摇匀后，加60%乙醇定容，放置15min;在510nm处测定吸光度。根据标准曲线计算总黄酮的含景。A总黄酮含量=2-100X稀释倍数MA为标准曲线中的含量。例如：测得的吸光度=0.504Y=0.0101x+0.0017AK-0.00170.504-0.0017=49.73A——0.01010.0101M为样品的质量（mg）上述是一组对比案例，但有着共同的特点:1、两位学生都有很强的自尊心，她们一心想获得好

5、成绩2、两位学生在遇到挫折后，均陷入了强大的心理压力之中，但结果不同。从根本上李某需要调节自己的心理问题，从而激发出内在的动力;而张某通过一次小小的数学测验这一外界因素激发了内在的信心和功力，获得了学习上一种成就感，步入了良性循环的发展轨道。上述两个案例代表了初中绝大多数学生的心理压力问题，而这种心理压力问题往往导致学生走两个极端。所以，把握和调适这种心理压力，并探索出一种科学的对策是班级管理中的重要内容。一、心理压力的基本状况1、大部分同学认为自己有心理压力。成绩越好，比例愈高，好多同学用“好烦，好累”来形容心理压力，显然心理压力已经超负荷2、心理压力主要来自于学习、人际关系或环境方面二、

6、心理压力的调适面对心理压力，我们应积极进行心理健康教冇，主动帮助学生进行心理调适，如①运动，游戏；②向朋友倾诉；③写日记；④与师生谈心；⑤大笑一场；⑥大睡一觉；⑦听音乐等。心理压力的疏导与宣泄对丁•学生的身心发展很足重耍，老师耍主动做他们的知心朋友和引路人，教会他们如何调整心态，减轻压力，面对人生。三、心理压力的对策针对心理压力的基本状况和产生的主要因素，我们应运用心理科学的理论和方法开展心理教育，切实做好攻“心”的艺术。1、针对学习方面的压力。我们既要让学生明确学习是学生的主要任务，明确学习H的、学习方向；又要重视社会实践和校园文化生活，以可能减较负担；耍“授人以渔”，培养学生的能力和方法

7、，树立正确的考试观和分数观。2、针对人际关系方面的压力。一方面，耍加强人际交往教育，鼓励学生相互沟通，相互信任，自我反省。另一方面，父母与孩子要“和平共处”，在和谐、平等的气氛中进行交流；根据孩子的实际情况，要给予正确的评价和适当的指导；宵定成功的同时，也有失败和挫折。再之，教师耍对学生公平、公正、尊重、信任，史要有“让我们一起努力”的思想。3、针对环境方面的压力。一方旭，家庭足学生学习的重耍场所，父母耍洁身