新疆紫草多糖的提取工艺研究

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1、新疆紫草多糖的提取工艺研究作者：乔秀文，曾宪佳，李洪玲，杜志坚，邵志刚【关键词】,紫草　　摘要:利用正交设计法优选紫草多糖的提取工艺。实验结果表明，紫草多糖超声提取的最佳工艺条件为:提取时间为0.5h，提取次数为3次，固液比1∶12。最佳工艺条件具有重现性、可靠性。　　关键词:紫草;紫草多糖;提取;正交设计Abstract:Objective:TheabstractmethodofArnebiaEuchromaPolysaccharidesalconditionseofultrasonicextractione，therateofsoli

2、dandliquidapolysaccharidesa;Arnebiaeuchromapolysaccharide;Abstractmethod;Orthogonaldesign　　紫草是传统中药材，其根药用，含多种萘醌类化合物――紫草素及其衍生物，具有显著的抗生育、抗炎、抗肿瘤、杀菌抗病毒和免疫调节等作用。此外，紫草中还含有紫草多糖。研究发现，紫草多糖具有抗病毒活性，能够激活巨噬细胞的吞噬功能，增强T淋巴细胞的数量和活性，抑制DFH强度，促进T淋巴细胞的免疫应答作用，具有促进肌体非特异性免疫和特异性的细胞免疫作用［1，2］。为促进紫草多

3、糖的应用，本文采用正交设计法对紫草多糖进行提取［3］，找出提取紫草多糖的最佳工艺条件。　　1仪器、材料与试剂　　1.1材料　　新疆软紫草［Arnebiaeuchroma（Royle）Johnst］（经石河子大学药学院生药教研室王琪、成玉怀老师鉴定）;苯酚（重蒸）;硫酸;无水乙醇;丙酮。（均为分析纯）　　1.2仪器　　722光栅分光光度计（上海精密科学仪器厂）;电子天平（北京赛多利斯天平仪器厂）;HH-S恒温水浴锅（）;DZKW-C电子恒温水浴（北京光明医疗仪器厂）　　2方法与结果　　2.1紫草多糖提取工艺的正交设计根据预试，影响紫草多糖提

4、取率的主要因素有提取的时间、次数和固液比等。故以L9（34）正交表进行实验设计，见表1。并以提取的紫草多糖的吸光度作为评价提取率高低的标准。表1紫草多糖提取因素水平（略）　　2.2回流法提取紫草多糖　　准确称取紫草干燥粉末40.0000g，分别用不同倍量的水浸不同时间，提取不同时间、次数后，抽滤，滤液减压浓缩至100ml加4倍量的无水乙醇沉淀，放置12h以上，抽滤，沉淀蒸干称重。即得1次醇沉后蒸干物。将1次醇沉后多糖粗提物分别加入无水乙醇、丙酮各50ml反复抽吸，抽滤，沉淀物再加100ml蒸馏水溶解，放置后，离心，取上层清液再加入4倍量无

5、水乙醇沉淀，抽滤，沉淀物在60℃烘干至恒重，即2次醇沉后多糖提取物。　　2.3紫草多糖吸光度的测定　　称取相同质量的各次提取的2次醇沉多糖，用水溶解后分别加入6ml苯酚溶液和30ml浓硫酸，30℃恒温30min后，冷水浴冷却至室温，定容到50ml，在490nm处测定吸光度，以不加样为空白。吸光度测定结果见表2，数据方差分析见表3。表2紫草多糖提取正交试验及吸光度（略）表3方差分析表（略）　　2.4正交放大实验　　按实验得出的紫草多糖最佳提取工艺，称取紫草100g，加入蒸馏水500ml，于20℃下恒温回流提取2h，过滤后滤渣再次分别加入40

6、0ml和300ml蒸馏水，回流提取两次。合并3次提取液，按测定紫草多糖吸光度的方法测定其吸光度值。重复3次，求其平均值。　　3讨论　　从表2中的实验结果表明，紫草多糖提取最佳工艺组合为:A1C3D3，既提取时间为30min，提取次数为3次，固液比为1:12。提取中各因素对紫草多糖提取率影响次序为C>A>B>D。表3中方差分析结果表明，各因素间无显著性差异，说明几个因素的联合作用对实验结果发生影响。按该最佳工艺组合进行的放大重复实验，也证实了紫草多糖的吸光度值超过正交设计表中的最大值，说明该组合工艺条件较为可行、可靠。　　

7、参考