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1、紫草素提取工艺的研究紫草素提取工艺的研究文章编号:1008-6919(2006)08-0061-02中图分类号:R965.3文献标识码:A【摘要】目的:研究紫草素的提取工艺。方法用纤维素酶酶解紫草,丙酮液浸提,紫外分光光度法测定其吸收度。采用L9(34)正交设计法进行实验设计。结果最佳提取工艺:在pH值5,1%。的纤维素酶条件下,在35°C酶解紫草12h,用丙酮液提取3次。结论工艺合理、可行,质量可控。关键词:紫草素紫草酶解法正交试验StudyonExtractingTechnigueofShikoninfromArnebiaEuchro
2、maJohnstOptimizedbyorthogonaldesignABSTRACT:AimTostudyaoptimumpreperationmethodofShikoninbyextractionfromArnebiaEuchromaJohnst.MethodSkikoninwasextractedbyacetonefromenzymedecomposedmixture,determinationtheabsorptioninUV・ThetestarearrangedbyorthogonaldesigewithL9(34)・Resu
3、ltThebestpreperingprocessis:pH5,andconsistencyoftheenzymeisl%o,theenzymedecomposedtemperatureis35°C,reactiontimes12h,byacetoneextraction3times・ConelusionTheexperimentresultsshowedthatthepreperationmethodispossibleandthequalityoftheproductcanbecontroled.[Keywords]:ArnebiaE
4、uchromaJohnst;Skikonin;enzyme;orthogonaldesige紫草为紫草科植物新疆紫草Arnebiaeuchroma(Royle)Johnst,紫草LithospermumerythrorbizonSiebetZucc,或内蒙紫草AmebiaguttataBunge的干燥根[1],具有凉血、活血、解毒、透疹Z功能。而从紫草的根屮所提取的紫草色素(蔡醜系色素),是一种天然食用色素,还可用于印染、制药、化妆品等工业,近期研究发现其有显著的抗癌作用[2],有着广阔的研究和
5、开发刖景。大部分中药材的细胞壁是由纤维素构成,植物的有效成分往往包裹在细胞壁内[3]o纤维素则是?-D-葡萄糖键以1,4-?-葡萄糖昔键连接,用纤维素酶酶解可破坏-D-葡萄糖昔键,从而破坏其细胞壁,进而有利于有效成分的提取[4,5]0根据这…原理,选用纤维素酶酶解紫草,并用丙酮提取紫草色素,紫外分光光度法测定其吸收度,采用正交试验,选择酶解温度、酶解吋间、酶止交表进行实验设计(表1),得出放佳酶解条件。这对提高中纱材解吋所需pH值、酶的浓度U!个因素,每个因素三个水平,用L9(34)的利用率,减
6、少浪费,减少药渣的处理和降低生产成本都具有较大的现实意义。1、实验材料及仪器1.1材料:纤维素酶Cellulase(FEINBIOCHEMICAGMBH&CO.T东省药品检验所提供)紫草干燥的紫色根状物(深圳市医药公司提供)丙酮(化学试剂CP•级)1.2仪器:电子天平AE240(METTLER)电热恒温水浴锅HH.S11-2(北京长安科学仪器厂)紫外分光光度计UV-2201SPECTROPHOTOMETER(日本岛津)2、实验方法2.1预试验取碎紫草lg,加丙酮10ml在室温(28°C,以下相同)下浸提取24h,滤过,残渣继续用等量丙酮浸
7、提直至滤液无色,水浴蒸干紫草加入1%。的纤维素酶及10ml蒸憾水,测得pH7,在45°C条件下水浴酶解24h,滤过,所得紫草残渣水浴蒸干,用丙酮10ml浸提24h,滤过,滤液呈浅紫色。此试验表明,紫草经酶解后提取可提高其提取率,即纤维素酶酶解紫草提高其有效成分的提取率试验具有可行性。2.2酶解取碎紫草500g,分成10份,每份50g编号1〜9,置于1000ml烧杯中,按正交表(表2)各加入适量的纤维素酶和蒸他水550ml,用HCL溶液或NaOH溶液调节适当的pH值,于不同温度下酶解适当吋间后滤过,紫草残渣水溶蒸干,同吋做一阴性对照试验(实
8、验号为0)o2.3提取将各试验号干紫草分别转移至2000ml的锥形瓶中,各加入丙酮1000ml,密封摇匀,在室温常压下浸提24h,滤过,滤液取样待测。2.4检测2.4.1量取4号样品0.2ml