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时间:2018-11-27
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1、陈皮多糖提取工艺的研究【摘要】目的研究陈皮多糖水提法的优化工艺。方法采用水浴加热提取方法,用L9(34)正交试验设计方案,考察固液比、提取温度、提取时间3种因素对陈皮多糖提取率的影响。结果水提陈皮多糖的最佳工艺参数是:固液比1∶10,提取温度100℃,提取时间6h,其多糖最高提取率可达7.61%。结论该优化工艺可用于陈皮多糖的提取。【关键词】陈皮多糖取正交设计试验 Abstract:ObjectiveTooptimizetheextractionprocedureofpolysaccharidein
2、tangerinepeel.MethodsByL9(34)orthogonaldesign,theeffectsofthesolidliquidratio,temperature,andextractiontimeontheextractionefficacyofpolysaccharideintangerinepeelumconditionsofthehotethodethodofpolysaccharideisfeasible. Keyg,蒸馏水溶解并于50mL容量瓶中定容,制得质量浓度为1m
3、g/mL的对照品溶液,分别精密移取2、4、6、8、10mL于100mL容量瓶中定容。精密量取稀释液各2mL,加入质量分数为6%的苯酚1mL、浓硫酸5mL,静置10min,摇匀,室温放置20min,在波长489.0nm处测定吸光度,以蒸馏水为空白对照。得到标准曲线方程:y=0.0137x+0.0445,r=0.9982。 2.4多糖含量测定 准确称取20mg多糖粗品溶于水,定容至250mL,按硫酸-苯酚法测定吸光度,用标准曲线计算多糖浓度。多糖提取率的计算依据以下公式:多糖提取率(%)=250Cfm
4、2/20m1×100%,式中,C为多糖粗品溶液的浓度,f为多糖的校正系数,取0.9〔4〕,m2为多糖粗品质量,m1为陈皮质量。 2.5正交实验〔5〕 选取对多糖提取率影响较大的3个因素,固液比(A)、提取时间(B)和提取温度(C),采用L9(34)正交法设计水浴浸提实验,实验方案设计的因素与水平见表1。 表1正交试验因素水平表(略) Tab.1Factorsandlevelsoforthogonaldesign 3结果与分析 3.1理化性质鉴别 陈皮多糖浸提液呈棕色,清香,弱酸性,在高浓
5、度乙醇、乙酸乙酯等溶剂中发生明显醇析现象。经特征反应鉴定,最终产物为糖类化合物,不含淀粉、还原性糖、甾体以及生物碱,但有少量蛋白质存在。 3.2正交试验结果与方差分析 以多糖提取率为考察指标,水浴浸提试验的结果与分析见表2。结果表明,陈皮多糖提取的最佳组合为A1B3C3,由此确定其提取工艺的优化参数:液固比1∶15,提取温度100℃,提取时间6h。由极差分析可知,3种因素对多糖提取率的影响程度依次为B>C>A,提取温度的影响最大,其次是提取时间和固液比。表3中方差分析也表明:B因素的影
6、响具有显著性意义(P0.05),A因素和C因素无显著性意义(P>0.05),与极差分析结果一致。 3.3验证实验 在多糖水提工艺中,按A1B3C3进行验证实验,得率为7.61%,验证实验结果与正交实验结果基本吻合,说明工艺可行。 表2正交试验结果与分析(略) Tab.2Resultsoforthogonaldesign 表3方差分析表(略) Tab.3Analysisofvariance 4讨论 4.1根据L9(34)正交试验筛选出水浴浸提陈皮多糖的最佳工艺参数是:固液比1∶
7、10,提取温度100℃,提取时间6h,多糖提取率可达7.61%。经验证实验证明该条件可行。 4.2多糖粗品的茚三酮检验以及280nm处紫外检测均显示产物不含蛋白质,但sevage法对粗品作脱蛋白处理〔正丁醇氯仿(体积比1∶4)〕后,发现有机层与水层间有少量乳滴,说明产物仍有微量蛋白质存在。 4.3本次研究只得到陈皮多糖的粗品,关于陈皮多糖的组成、结构以及生理活性还需要纯化处理后再作进一步研究。【
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