胎盘因子的制备及其对淋巴细胞免疫调节作用的体外研究

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1、胎盘因子的制备及其对淋巴细胞免疫调节作用的体外研究【摘要】　　为了建立制备胎盘因子（placentafactor,PF）的新方法，研究PF理化性质，并探讨PF体外应用对淋巴细胞的影响，应用超滤法制备PF，对PF的含量及各种成分的分子量进行测试，并以环孢素A(CsA)为阳性对照，生理盐水(NS)为阴性对照。应用甲基噻唑基四唑（MTT）法检测植物血凝素（PHA）诱导的淋巴细胞增殖及混合淋巴细胞反应（MLR）；应用流式细胞术检测T细胞CD69的表达；应用乳酸脱氢酶释放法测定自然杀伤（NK）细胞对肿瘤细胞K562的杀伤作用。结果表明：在本研究中所制备的P

2、F是一组小分子多肽类物质，主要含有两种成分，分子量分别为9.187kD及4.794kD；用Bradford法证实，多肽质量为5.7-6.9mg/g鲜重胎盘。体外研究显示，PF抑制PHA诱导的淋巴细胞增殖及混合淋巴细胞反应的作用与环孢菌素A（CsA）相当（P>0.05）。PF和CsA均可下调佛波酯（PMA）+离子霉素（ionomycin）刺激后T淋巴细胞活化抗原CD69的表达（PFvsCsA,P>0.05）。细胞杀伤试验显示，PF组NK细胞杀伤活性略高于或等于NS组（P>0.05），而CsA组杀伤活性明显低于NS组（P<0.

3、05）。结论：建立了制备PF的新方法，并首次证实PF在体外对T细胞有强大的免疫抑制作用，可抑制由丝裂原及异基因抗原诱导的T细胞的增殖及活化，而且并不影响甚或促进NK细胞对肿瘤细胞的杀伤。这一结果表明，PF在抑制移植物抗宿主病（GVHD）的同时，或许可以较好地保留移植物抗肿瘤效应（GVT），是一种较理想的、有应用潜能的抗GVHD制剂。【关键词】胎盘因子　淋巴细胞　环孢菌素A　T细胞；NK细胞　免疫调节作用　　PreparationofPlacentaFactorandItsImmunoregulatoryEffectsonLymphocytesIn

4、VitroAbstractThestudyedtoestablishaneethodofpreparationofhumanplacentafactor(PF)andtodetermineitsphysicchemicalproperties,asphocytesinvitro.PFolecularinedbyBradfordmethodandSDSPAGE,respectively.CyclosporinA(CsA)alsaline(NS)ulatedlymphocyteproliferationandmixedlymphocytereac

5、tion(MLR)etry.Cytotoxicityofnaturalkiller(NK)cellsagainstK562tumorcellsinedinedtobeagroupofloolecularajorponentsolecularg/gfreshplacenta.PFhadsimilarsuppressiveeffectsonPHAstimulatedlymphocyteproliferationandMLRinvitroasparedulatedbyPMAplusionomycin(PFvsCsA,P>0.05).Thecyt

6、otoxicityofNKcellsagainstK562cellsinPFgroupuchloethodofpreparationofPFhasbeenestablished.ThisstudyfirstdemonstratesthatPFhasstrongimmunosuppressiveeffectsonTcellinvitro,andsuppressesTcellproliferationandactivationinducedbymitogenandalloantigen.ThisstudyindicatsthatPFhasnoanyi

7、nhibitoryeffects,butevenenhancesthecytotoxicityofNKcellsagainstK562tumorcells.TheseresultssuggestthatPFmayhavesuppressiveeffectsongraftversushostdisease(GVHD)inishinggraftversustumor(GVT)effects.Therefore,PFmayprobablybeanidealandpromisingagentagainstGVHD.Keyphocyte;cyclo

8、sporinA;Tcell;naturalkillercell;immunoregulutoryeffectJExpHematol200