胎盘因子的制备及其对淋巴细胞免疫调节作用的体外研究论文

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1、胎盘因子的制备及其对淋巴细胞免疫调节作用的体外研究论文【摘要】为了建立制备胎盘因子（placentafactor,PF）的新方法，研究PF理化性质，并探讨PF体外应用对淋巴细胞的影响，应用超滤法制备PF，对PF的含量及各种成分的分子量进行测试，并以环孢素A(CsA)为阳性对照，生理盐水(NS)为阴性对照。应用甲基噻唑基四唑（MTT）法检测植物血凝素（PHA）诱导的淋巴细胞增殖及混合淋巴细胞反应（MLR）；应用流式细胞术检测T细胞CD69的表达；应用乳酸脱氢酶释放法测定自然杀伤（NK）细胞对肿瘤细胞K

2、562的杀伤作用。结果表明：在本研究中所制备的PF是一组小分子多肽类物质，主要含有两种成分.freelg/g鲜重胎盘。体外研究显示，PF抑制PHA诱导的淋巴细胞增殖及混合淋巴细胞反应的作用与环孢菌素A（CsA）相当（P0.05）。PF和CsA均可下调佛波酯（PMA）+离子霉素（ionomycin）刺激后T淋巴细胞活化抗原CD69的表达（PFvsCsA,P0.05）。细胞杀伤试验显示，PF组NK细胞杀伤活性略高于或等于NS组（P0.05），而CsA组杀伤活性明显低于NS组（P0.05）。结论：建立了制

3、备PF的新方法，并首次证实PF在体外对T细胞有强大的免疫抑制作用，可抑制由丝裂原及异基因抗原诱导的T细胞的增殖及活化，而且并不影响甚或促进NK细胞对肿瘤细胞的杀伤。这一结果表明，PF在抑制移植物抗宿主病（GVHD）的同时，或许可以较好地保留移植物抗肿瘤效应（GVT），是一种较理想的、有应用潜能的抗GVHD制剂。【关键词】胎盘因子淋巴细胞环孢菌素AT细胞；NK细胞免疫调节作用PreparationofPlacentaFactorandItsImmunoregulatoryEffectsonLympho

4、cytesInVitroAbstractThestudyedtoestablishaneethodofpreparationofhumanplacentafactor(PF)andtodetermineitsphysicchemicalproperties,asphocytesinvitro.PFolecularinedbyBradfordmethodandSDSPAGE,respectively.CyclosporinA(CsA)alsaline(NS)ulatedlymphocyteprol

5、iferationandmixedlymphocytereaction(MLR)etry.Cytotoxicityofnaturalkiller(NK)cellsagainstK562tumorcellsinedinedtobeagroupofloolecularajorponentsolecularg/gfreshplacenta.PFhadsimilarsuppressiveeffectsonPHAstimulatedlymphocyteproliferationandMLRinvitroas

6、paredulatedbyPMAplusionomycin(PFvsCsA,P0.05).ThecytotoxicityofNKcellsagainstK562cellsinPFgroupuchloethodofpreparationofPFhasbeenestablished.ThisstudyfirstdemonstratesthatPFhasstrongimmunosuppressiveeffectsonTcellinvitro,andsuppressesTcellproliferationa

7、ndactivationinducedbymitogenandalloantigen.ThisstudyindicatsthatPFhasnoanyinhibitoryeffects,butevenenhancesthecytotoxicityofNKcellsagainstK562tumorcells.TheseresultssuggestthatPFmayhavesuppressiveeffectsongraftversushostdisease(GVHD)inishinggraftver

8、sustumor(GVT)effects.Therefore,PFmayprobablybeanidealandpromisingagentagainstGVHD.Keyphocyte;cyclosporinA;Tcell;naturalkillercell;immunoregulutoryeffectJExpHematol2007;15(3):567-572胎盘组织功能复杂，是母体和胎儿之间的免疫屏障。许多学者证实，胎盘中的大分子蛋白胎盘球蛋白，以及胎盘组织培养上