红芪多糖对小鼠脾淋巴细胞免疫调节作用的实验研究

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1、分类号：Ｒ２８５．５密级：公开鴻Ｗ書专业学位研巧生学位论文红常多糖对小鼠脾淋臣细胞免疫调节作用论文题目（中文）的实验研究ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｏｎｔｈｅｒｅｕｌａｔｉｎｇｙｇ＊论文题目（外文）ｅｆｆｅｃｔｓｏｆＨｅｄｓａｄＲａｄｉｘＰｏｌｓａｃｃｈａｉｉｄｅｏｎｙｙｉｍｍｕｎｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｉｎｍｉｃｅ研巧生姓名李磊强学位类别临床医学专业学位专业学位领域中西医结合临床学位级别硕±校内导师姓名、职称程卫东教授校外导师单位、

2、姓名论文工作起止年月２０１３年０４月至２０１５年０３月论文提交日期２０１５年０４月论文答辩日期２０１５年０５月学位授予日期２０１５年０６月校址：甘肃省兰州市原创性声明：本人郑重声明本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等，均已明确注明出处。除文中己经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体，均己在文中明确方式标明。本声明的法律责任由本人承扭。分、ｒ

3、：日期义ｆ论文作者签名：＞关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定，同意学校保存或向国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权兰州大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时一，第署名单位仍然为兰州大学。本学位论文研巧内容：公开□不宜公开，已在学位办公室办理保

4、密申请，解密后适用本授权书。一＂Ｖ＂（请在上选项内选择其中项打）论文作者签名：导师签名：（＂日期Ｉ：作日期．．又：＞作５／红庚多糖对小鼠脾淋田细胞免疫调节作用的实验研究中文摘要目的：探讨红误多糖（ＨＰＳ）对小鼠脾淋己细胞的免疫调节作用及蛋白表达图谱的影响。方法：１．制备正常小鼠脾淋己细胞悬液，用ＭＴＴ法检测红巧多糖对小鼠脾＋淋己细胞的刺激增殖作用，３叮淋己细胞和ＣＤ８叮流式细胞术检测ＣＤ！及ＣＤ４－２－４－淋己细胞比例，ＥＬＩＳＡ试剂盒测定培养上清中的化、正、ＩＮＦＹ含量。２．审。备正常小鼠脾淋己细胞

5、悬液，分为ＨＰＳ组和对照组，培养７２小时后，采用标准裂解法提取脾淋巴细胞总蛋白，并用丙丽沉淀法对提取的脾淋己细胞蛋白进行纯－，验证丙厕沉淀法是化，比较丙丽沉淀法纯化前后的的蛋白样品所得２ＤＥ图谱一否适用于脾淋己细胞蛋白的制备，同时对第相等电聚焦电泳条件进行优化，银。３染显色后比较各凝胶图像．采用方法２优化后的双向电泳方法分离脾淋己细，银染显色，ＰＤｕｅｓ巧．０软件对凝胶图谱进行差异点分析胞蛋白Ｑ，找出差异明显的蛋白质点。：１ＭＴＴ实验结果表明：培养７２ｈ后，４０、８０、１００、２００峭／ｍｌ的红误结果．＾多糖均能显著的促进

6、脾淋己细胞的增殖（ｉ＜〇．〇５），且１００＾１３／１１１１时作用最强，＋故选用终浓度为１０（Ｖｇ／ｍＩ作为干预浓度，用于后续实验；ＨＰＳ干预后，ＣＤ３总＋Ｔ淋Ｅ细胞百分比増加（户＜〇．〇５），且ＣＤ３ＣＤ８叮淋己细胞比例上调（ｆＯ．Ｏｌ）；－－＜０：正２含量增加（ｆＯ．０５），而细胞培养上清检测显示．Ｏｌ），ＩＮＦ丫增加（ｆ－４含量减少比（戶＜０．０５）。２．丙丽沉淀法能够增加蛋白的溶解性，增加蛋白点－数目，同时对等电聚焦程序的优化，也使得２ＤＥ图谱的纵向和横向拖尾盈著减－．少，蛋白质点分离良化２ＤＥ图谱分辨率提高．ＰＤｕｅｓｔ８

7、ＨＰＳ组。３Ｑ０软件分析和对照组的２－ＤＥ图ＨＰ６谱，结果显示：Ｓ组中共有１个蛋白点发生明显改变，４１其中１１个蛋白质点高表达，个蛋白质点消失个蛋白质点低表达。，－结论；１．册Ｓ能够调节贿淋己细胞的免疫功能，增加Ｌ２分泌，且能诱导Ｔｈｌ细胞分化，Ｗ增强细胞免疫应答能力为主。２．标准裂解法结合巧丽沉淀法适用于小鼠脾淋Ｅ细胞蛋白的提取和纯化，利用优化后的双向电泳方法获得了－ＤＥ图谱ＨＰ显著影响正常小鼠酷淋己邸Ｓ作用小鼠脾淋己细胞蛋白的２。３．Ｓ能细胞蛋白质的表达。１关键词：红廣多撤蛋白质姐学，小敲脾淋己细胞，差异蛋白质

8、ＩＩＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｏｎｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｉｎｅｆ