肾穿刺标本的常规染色制作程序探讨

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1、肾穿刺标本的常规染色制作程序探讨【关键词】肾穿刺活体标本；制作；程序　　［摘要］目的：探讨肾穿刺标本制作技术特点，制订一套较快而稳定的制作程序。方法：对本科室5千多例肾穿活检病例制作的技术和步骤进行比较和总结。结果：本科室5千多例肾穿刺活检标本的冰冻切片，HE切片，PAS，PASM,Masson三色以及刚果红和甲基紫等特殊染色都完全满足病理诊断。结论：本科采用的肾穿刺活体标本制作程序稳定而且较快。　　［关键词］肾穿刺活体标本；制作；程序　　TheInvestigationofRoutineStainingProcedureforRenalB

2、iopsy　　LAIYingrong，TAOYu,LIANGYingjie　　(SUNYATSENUniversitytheFirstAffiliatedHospital,Guangdong510080,China)　　Abstract：ObjectiveToexplorethetechniqueskillofmakingspecimensofkidneyBiopsyviaparacentesisandtocreateasetofstableandfastprocedure.MethodsThetechniqueskillandproced

3、uresthatakemorethanfivethousandkidneyBiopsyspecimensviaparacentesisinourlaboratoryensadepletelyhaveaccordanceethylviolet.ConclusionTheproceduresakekidneyparacentesisspecimensarestaleandfast.　　Key~5μm，作IgG、IgA、IgM、C3、Glq、Fg抗体检查，石蜡包埋切片2μm~3μm，分别作常规HE染色，PAS，MassonPASm以及刚果红和甲基

4、紫等特殊染色。　　1．2　六胺银法(PASM)　　1.2.1　Gomori六胺银染色法溶液配制　　　　　　　　　　　　　　六胺银贮备液：5％硝酸银水溶液5ml+3％六次甲基四胺100ml,配好4℃冰箱备用；5％四硼酸钠水溶液；六胺银工作液：六胺银贮备液10ml+双氧水20%+5％四硼酸钠水溶液2ml。　　1.2.2　PASm染色步骤　　　　　　　　　　　　　　切片脱蜡至水；0．5％高碘酸氧化30min，水洗；10％铬酸氧化20min，或2％硫酸铁铵水溶液用微波加温(低挡)2min，水洗，1％偏重亚硫酸钠水溶液处理30s，水洗，蒸馏水洗；放入

5、六胺银工作液20min~30min65℃水浴箱中或用微波加温(低挡)4min，取出切片，蒸馏水洗，镜检以肾小球毛细血管基底膜出现黑色的沉淀为标准；0．1％氯化金水溶液调色30s；流水冲洗10min；Maery氏苏木素5min；流水冲洗5min；0．5％伊红染3min；常规脱水透明封片。结果：肾小球囊基底膜和肾毛细血管球基底膜，弹力纤维及一些网状纤维是黑色，细胞核蓝褐色，细胞浆浅红色。　　1．3　Masson三色法　　1.3.1　试剂配制　　　　　　　　　　　　　　丽春红酸性品红液：丽春红0．7g+酸性品红0．3g+蒸馏水99ml+冰醋酸1m

6、l；1％磷钼酸水溶液：磷酸1g+蒸馏水加至100ml；2％苯胺蓝液：苯胺蓝2g冰醋酸2ml+蒸馏水100ml。　　　1.3.2　操作方法　　　　　　　　　　　　　　切片脱蜡至水；Bouin氏液补充固定微波低挡2min或60℃水浴1h；流水稍洗；天青石蓝染液3min；Mayer氏苏木素5min；水稍洗；2％盐酸酒精分化；水冲洗数分钟；春红酸性品红液染5min~10min；蒸馏水稍冲洗；磷钼酸水溶液处理约5min；直接用苯胺蓝液或亮绿液复染5min；1％冰醋酸1min；95％酒精稍冲洗，常规脱水透明封片。结果：胶原纤维呈蓝色(用苯胺蓝液复染)或

7、绿色(用亮绿复染)。胞质、肌纤维和红细胞，免疫复合物红色，细胞核蓝褐色。　　1．4　高碘酸―无色品红法(PAS)　　1.4.1　试剂配制　　　　　　　　　　　　　　0．5％高碘酸水溶液：高碘酸0．5g+蒸馏水加至100ml；0．5％偏重亚硫酸钠液：偏重亚硫酸钠0．5g+蒸馏水100ml；无色品红液(Schitf氏试剂)：碱性品红1g+蒸馏水200ml+1N盐酸20ml+偏重亚硫酸钠1．5g+活性碳1．5g。　　1.4.2　操作方法　　　　　　　　　　　　　切片脱蜡至水；0．5％高碘酸氧化5min~8min；流水冲洗2min，再用蒸馏水洗；入

8、无色品红液于暗处并加盖作用10min~20min；0.5％偏重亚硫酸钠液滴洗2次，每次约1min；流水冲洗5min；Mayer氏苏木素1min；稍水洗；常规脱水透明，中性树胶封固