大鼠脑损伤后大脑皮层代谢型谷氨酸受体1a的表达变化及意义

大鼠脑损伤后大脑皮层代谢型谷氨酸受体1a的表达变化及意义

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1、大鼠脑损伤后大脑皮层代谢型谷氨酸受体1a的表达变化及意义摘要:目的研究大鼠加速性弥漫性脑损伤后大脑皮层代谢性谷氨酸受体1a(mGluR1a)的基因和蛋白表达变化与其拮抗剂a-甲基-4-羧基苯氨基乙酸(MCPG)的作用.方法SD大鼠165只随机分为mGluR1a变化和MCPG作用2组.每组又分为不同的亚组.采用Marmarou大鼠加速性弥漫性脑损伤模型.在伤后不同时间大鼠断头取脑进行免疫组化,RT-PCR技术和病理学研究.结果伤后1h大脑皮层mGluR1a的表达开始增加,24h达高峰(13.9±2.3)HP-1,P<0.01.在伤后7d,MCPG治疗可使损伤神经元数量明显减少

2、(4.22±1.63)HP-1,P<0.05.结论mGluR1a参与外伤后的神经元损伤,其拮抗剂MCPG可能对脑损伤有治疗作用.  KeyGluR;geneexpression;MCPG  Abstract:AIMTostudythechangeofmetabotropicgluta-matereceptor1a(mGluR1a)expressioninarodentmodelofimpactaccelerationdiffusebraininjuryandtheeffectofitsantagonista-methyl-4-carboxyphenylglycine(MCP

3、G).METHODS165maleSDratsizedintotGluR1aandeffectofMCPG.Eachgrouparouou’srodentmodelofimpactaccelerationdiffusebraininjury,ratsGluR1ainedbyimmunohistochemistry,RT-PCRandtheeffectofMCPGinedbypathologi-calmethodatdifferenttimeafterinjury.RESULTSAt1hafterinjurytheexpressionofmGluR1aincreasedandthe

4、mostrobustincreaseoccurredat24hafterinjuryintheinjuredcerebralcortex(13.9±2.3)HP-1,P<0.01.Administra-tionofMCPGreducedtotalcorticalnecroticneuronscountsonthe7dayafterinjury(4.22±1.63)HP-1,P<0.05.CONCLUSIONThechangeofmGluR1aaftertraumaticbraininjuryandtheneuroprotectiveeffectsofMCPGsugge

5、stthattheactivationofmGluR1acontributestopost-traumaticneuronaldamageandthatMCPGmayhavetherapeuticpo-tentialinheadinjury.  0引言  谷氨酸(Glu)是中枢神经系统(S)主要的兴奋性神经递质,它的兴奋性毒性是导致神经元损伤的重要因素.创伤性脑损伤(TBI)可引起Glu的过量释放[1-3],激活Glu受体并最终导致神经元死亡.Glu通过离子型谷氨酸受体(iGluR)和代谢性谷氨酸受体(mGluR)作用于神经元.但目前的研究主要集中在iGluR,而关于mGluR在

6、脑损伤病理生理中的作用却知之甚少.我们拟在Marmarou弥漫性脑损伤模型基础上,从基因和蛋白水平探讨伤后不同时间大鼠大脑皮层mGluR1a表达的变化及其拮抗剂MCPG的作用和意义.  1材料和方法  1.1材料  健康雄性SD大鼠165只,体质量340~375g,随机分成2组:mGluR1a变化和MCPG作用2组.其中mGluR1a变化组又分为免疫组化、RT-PCR及其各自的对照组共4个亚组;每个亚组分损伤后1,6和24h;3,7和14d6个时间点,每个时间点5只大鼠.MCPG作用组又分为假手术对照组、生理盐水(NS)和MCPG治疗3个亚组,每个亚组分伤后1,7和14d3个时间

7、点,每组5只大鼠.大鼠称重后,以20gL-1戊巴比妥钠溶液ip麻醉(40mgkg-1).立体定向头架固定大鼠头部,正中切开大鼠顶部头皮,在冠状缝与人字缝之间,用高分子聚脂固定一金属圆盘(直径8mm,厚2mm)于顶骨上.将大鼠移置在一个以知弹性系数的海绵上,900g铜棒在一有机玻璃管内由1m高处自由坠落在金属圆盘上,即刻移开海绵及大鼠以免铜棒反弹造成二次击伤[4].去除死亡及有骨折的大鼠.假手术对照组无头部坠落伤.MCPG作用组除以上准备外,还要在前囟后1.2mm,左侧1.5mm的

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