白藜芦醇干预对慢性心房纤颤猪心房组织中去乙酰化酶1表达的影响

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1、白藜芦醇干预对慢性心房纤颤猪心房组织中去乙酰化酶1表达的影响：周晓峰，王志荣，张卓琦，张超群，徐晤【摘要】目的探讨白藜芦醇(resveratrol，RES)干预对快速右房起搏诱发的慢性心房纤颤(atrialfibrillation，AF)猪心房组织中去乙酰化酶(SIRT)1表达的影响。方法18头小家猪(雌雄不拘)随机分为3组(n=6)：起搏组(ATP组)、假手术组(sham组)和白藜芦醇干预组(RES组)。采用Seldinger血管穿刺技术穿刺右或左侧颈内静脉送入双极电极至右心房并连接至实验用起搏器(AOO)，快速起搏心房(500次/min)2

2、周(假手术组猪不起搏)制备慢性AF实验模型。RES组猪于起搏前1周开始服用RES(2.5mg·kg-1·d-1)。RT-PCR分析SIRT1mRNA表达情况，RNA和蛋白的表达较ATP组和sham组均明显增加(P<0.05)，ATP组稍高于sham组但差异无统计学意义(P>0.05)。结论RES干预可以明显增强快速起搏右房诱发的慢性AF猪心房组织中SIRT1的表达。【关键词】抗氧化剂;心房纤颤;猪　　Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectofresveratrolinterventionon

3、theexpressionofSIRT1intheatrialtissuesinpigsizedinto3groups:atrialtachypacing(ATP)group(n=6),resveratrol-intervened(RES)group(n=6)andshamgroup(n=6).Abipolarelectrodeentalpacemakers(AOO)insubcutaneouspocketsintheneck.ThepigsinATPgroupandRESgroupinutefor2odels.Resveratrol(2.5m

4、g·kg-1·d-1)orningofthefinalopen-chestexperiment.TheexpressionofSIRT1mRNAinedbyRNAandproteinintheRESgrouparkedlyhigherthanthatinATPgroupandtheshamgroup(P<0.05);andtheexpressionofSIRT1mRNAandproteinintheATPgroupgroup,butthedifferencehadnostatisticalsignificance(P>0.05).C

5、onclusionResveratrolinterventioncansignificantlyenhancetheexpressionofSIRT1intheatrialtissuesinpigsega公司。聚合酶链反应(PCR)引物由上海生工生物工程技术有限公司合成，引物序列：GAPDH正向5′-ATTCCACGGCACAGTCAA-3′，反向5′-CATCACGCCACAGTTTCC-3′;SIRT1正向5′-TGTCAGAATTACCACCCA-3′，反向5′-TTACCATCAAGCCGTTTA-3′。　　1.2方法　　1.2.1模型

6、的制备18头健康小家猪体重为(37.4±2.5)kg，年龄2～3个月，随机分为3组(n=6)：起搏组(ATP组)、假手术组(sham组)和白藜芦醇干预组(RES组)。采用3%戊巴比妥1ml/kg肌内注射麻醉，固定四肢，置于导管床上，四肢连接心电图机。采用Seldinger血管穿刺技术穿刺右侧颈内静脉，经鞘管送入四极标测电极导管至右心房，测定心房有效不应期后，采用Burst刺激诱发房颤，记录AF持续时间。切开右侧颈部皮肤，分离皮下组织做囊袋，换用8F可撕开鞘管，X线透射下送入“J”形心房电极导管，电极头端固定在右心耳，测量起搏参数满意后，连接实验

7、用埋藏式体外磁铁控制的高频心脏起搏器，并埋于颈部皮下。术中及术后4天每日给予头孢唑啉钠3.0g肌内注射，起搏器的起搏方式为AOO型，起搏频率为500次/min，持续起搏2周，每周记录一次标准肢体导联心电图以检查起搏状态及心电图改变。假手术组只进行电生理检查，不予起搏。RES组术前1周给予RES(2.5mg·kg-1·d-1)喂养，直到起搏2周后，起搏器的安置同起搏组。　　1.2.2l/kg肌内注射麻醉，关闭起搏器，待恢复窦律后重复电生理检查，然后处死动物，取出心脏，快速取左右心房组织放入-80℃冰箱冻存。机械匀浆，4℃1000g×15min离心

8、(提取核蛋白时,弃上清,加bufferA于沉淀中混匀,4℃10000g×15min离心，弃上清,加bufferB于沉淀中4℃摇床30min，4℃120