吡格列酮对糖尿病大鼠肾皮质血管内皮生长因子表达的影响

《吡格列酮对糖尿病大鼠肾皮质血管内皮生长因子表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、吡格列酮对糖尿病大鼠肾皮质血管内皮生长因子表达的影响：阚春婷，吴晨光，张明，王丽【摘要】目的：探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialgrog/kg）建立糖尿病模型，将糖尿病大鼠随机分为糖尿病组(DM组)、糖尿病吡格列酮（pioglitazone10mg·kg-1·d-1）干预组（DP组），并以正常组（NC组）作对照。②干预8周后，观察各组大鼠24h尿蛋白（mg/24h）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、血糖及血脂的变化；用免疫组织化学和逆转录PCR检测肾皮质VEGF蛋白及mRNA表达。结果：①D

2、M组大鼠24h尿蛋白、BUN、Scr、肾皮质VEGF蛋白及mRNA表达均较NC组明显升高；DP组大鼠24h尿蛋白、BUN、Scr、肾皮质VEGF蛋白及mRNA表达较DM组均有降低。②DM组血糖、血脂与NC组相比，差异有统计学意义，与DP组比较差异无统计学意义。结论：糖尿病大鼠肾皮质VEGF表达增强，吡格列酮可抑制糖尿病大鼠肾皮质VEGF的表达，减少尿蛋白，改善肾功能，延缓糖尿病肾病的发生、发展，发挥非降糖的直接肾保护作用。【关键词】糖尿病肾病；吡格列酮；血管内皮生长因子［Abstract］Objective:Toinves

3、tigatetheeffectofpioglitazoneontheexpressionofvascularendothelialgroodelg/kg),anddiabeticratslydividedinto2groups:untreateddiabetesmellitusgroup(DMgroup)，pioglitazonetreateddiabetesmellitusgroup(DPgroup10mg·kg-1d-1).Inaddition,thenormalratsservedasanormalcontrolg

4、roup(NCgroup).Eightureanitrogen,serumcreatinine,bloodglucoseandserumtipidsmunohistochemistyandReversetranscriptionPCR.Results：paredureanitrogenandserumcreatinineinDMgroupureanitrogenandserumcreatinineRNAexpressionaftertreatmentgroup.Bloodglucoseandserumlipidsprof

5、ileelioraterenalfunction,echanismmaybesomedirectnephroprotectiveeffects.［Keyg·kg-1·d-1，江苏恒瑞药业提供）。禁食24h后，DM及DP组单次腹腔注射链尿佐菌素（STZ）（0.1mol/L无菌枸橼酸缓冲液配制，6.5mg/ml，pH4.3，55.0mg/kg）；NC组单次腹腔注射同等剂量的枸橼酸缓冲液。72h后采尾静脉血，以美国强生血糖仪测定血糖，高于16.7mmol/L者入组。DP组予以吡格列酮混悬液灌胃，NC，DM组予以相应量生理盐水灌胃

6、。1.2标本收集干预8周后，处死大鼠。处死前代谢笼收集24h尿，记尿量，待测尿蛋白。处死当天尾静脉采血测血糖，以氯胺酮（10mg/kg）腹腔注射麻醉各组大鼠，心脏取血3ml，分离血清，待测血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）及血脂。肾脏经生理盐水灌洗后除肾包膜测肾重，肾脏肥大指数(KI)以肾重/体质量×1000表示。右侧肾脏-70℃冻存以备逆转录PCR检测。左侧肾脏取部分肾皮质于4%低聚甲醛固定，石蜡包埋，制成4μm切片，以备肾脏病理检查及免疫组织化学检测。1.3血、尿标本检测用日本爱科来GT1810型血糖仪（葡萄糖氧化

7、酶法）尾静脉采血测定血糖，用日本奥林帕斯AU2700全自动生化分析仪测定血脂、血Cr、血BUN，用双缩脲法测定24h尿蛋白。1.4免疫组织化学检测所有标本按常规方法固定，包埋，切片厚4μm，行HE染色。采用EnVision法检测肾组织中VEGF。石蜡切片脱蜡至水后加抗原修复液，滴加兔抗大鼠VEGF抗体(1∶200，博士德公司)，4℃过夜，加生物素标记的羊抗兔二抗（1∶50,Sigma公司），滴加新配制的ABC复合物、DAB显色剂，苏木精复染，脱水，透明，甘油明胶封固，以PBS代替一抗为阴性对照。胞质棕色为阳性着染。先低倍镜

8、下观察，然后在200倍光镜下，随机分别采集皮质区30个视野内的肾小球，用全自动图像分析系统(Imageproplus4.5)分别计数其积分光密度（integratedopticaldensity，IOD）值，取其均值分析。1.5RTPCR测定肾皮质VEGFmRNA从大鼠右侧肾脏取肾皮质100mg，采用