苯那普利对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

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1、苯那普利对糖尿病大鼠肾脏的保护作用：刘楠楠董志恒李才张逢春【摘要】目的探讨苯那普利对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法将34只组，12只)、苯那普利治疗组(DMB组，12只)。DM组及DMB组大鼠一次性腹腔注射STZ50mg/kg，制备糖尿病大鼠模型;N组腹腔注射等量生理盐水。血糖稳定1g·kg-1·d-1灌服，共观察12RNA表达。结果第12周DMB组大鼠血胆固醇、肌酐、尿素氮及尿白蛋白排泄量、内生肌酐清除率较DM组明显减少(P<0.01或P<0.05);DMB组CTGFmRNA的表达较DM组明显减少(P

2、<0.05)。结论苯那普利对糖尿病大鼠肾脏具有部分保护作用，其机制可能是抑制肾脏CTGFmRNA的表达。【关键词】糖尿病肾病;结缔组织生长因子;苯那普利　　【Abstract】ObjectiveTostudytherenalprotectiveeffectsofbenazeprilindiabeticratsanditsmechanisms.Methods34)andbenazepritreated(DMB)groups.Thelevelsofplasmaglucose,serumcholesterol,serum

3、creatinine,bloodurianitrogen,urinaryalbuminandthecreatinineclearancerateent.TheexpressionsofCTGFmRNAindiabeticratscholesterol,urianitrogen,creatinineandurinaryalbuminexcretion,creatinineclearancerateinDMBgroupRNAinDMBgrouperenalprotectiveeffectsondiabeticrats.This

4、mightresultfromdecreasingexpressionsofCTGFmRNAofkidney.　　【Keya公司)，血糖高灵敏度试剂(长春汇力生物工程技术开发中心)，尿葡萄糖检查试纸条(桂林中辉生物技术有限公司)，CTGF及βactin引物序列(北京鼎国生物技术发展公司)，逆转录酶试剂盒(Invitrogen公司)，DNAmarker(Takara公司)。　　1.3方法　　1.3.1糖尿病模型的建立将34只大鼠随机分为正常对照组(N组，n=10)、糖尿病未治疗组(DM组，n=12)及DM加苯那普利治疗组(

5、DMB组，n=12)，每组雌雄各半。对DM组及DMB组大鼠一次性腹腔注射STZ50mg/kg，临用前将STZ溶于0.01mol/L枸椽酸缓冲液中(pH4.2)。N组腹腔注射等量生理盐水。72h后测量空腹血糖及尿糖定性，空腹血糖≥16.7mol/L，尿糖定性≥，大鼠多饮、多食和尿量增加者为糖尿病大鼠模型。待血糖稳定1g·kg-1·d-1灌服，共观察12l/min)=尿肌酐÷血肌酐×每分钟尿量。　　1.3.5大鼠肾脏CTGFmRNA的表达RNA提取：将存放的肾组织用冰盒取出，按Trizol试剂说明书操作。分别取N组、DM组、

6、DMB组的肾脏皮质100mg。提取肾脏组织总RNA，取其中1μg，应用RTPCR方法进行RTPCR反应，CTGF上游引物为：5′CTAAGACCTGTGGAATGGGC3′;下游引物序列为：5′CTCAAAGATGTCATTGCCCCC3′;用引物可扩增出长度为383bp的CTGFcDNA片段;βactin引物序列分别为：上游5′GTGGGCGCTCTAGGCACCAA3′，下游5′CTCTTTGATGTCACGCACGATTTC3′，用引物可扩增出长度为540bp的βactincDNA片段。PCR

7、产物的检测和分析：用1.5%琼脂凝胶电泳分析，紫外灯下拍照，用凝胶成像处理系统对每一标本的PCR产物扩增特异性片段进行灰度扫描，并以βactin作为参考定量标准，数值以两者之间吸光度(Int)×面积(pix)比值表示，以对照组的比值作为标准1.0，计算CTGF基因相对表达量。　　1.4统计学处理所有数据用x±s表示，采用SPSS11.5软件进行方差分析检测，肾组织半定量分析采用秩和检验。　　2.2空腹血糖及24h尿蛋白定量空腹血糖DM组和DMB组大鼠空腹血糖均明显高于N组(P<0.01);DMB组与DM组比较空腹血

8、糖降低不显著(P>0.05)。24h尿蛋白定量与N组比较DM组和DMB组大鼠24h尿蛋白排泄量显著增高(P<0.05、P<0.01)，而DMB组24h尿蛋白排泄量明显低于DM组(P<0.05)。见表2。　　2.3血生化检测结果DM组与DMB组大鼠12周末血清BUN、Scr、Ccr