苯那普利对糖尿病大鼠肾脏的保护作用论文

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1、苯那普利对糖尿病大鼠肾脏的保护作用论文刘楠楠董志恒李才张逢春【摘要】目的探讨苯那普利对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法将34只组，12只)、苯那普利治疗组(DMB组，12只)。DM组及DMB组大鼠一次性腹腔注射STZ50mg/kg，制备糖尿病大鼠模型;N组腹腔注射等量生理盐水。血糖稳定1g·kg-1·d-1灌服，共观察12RNA表达。结果第12周DMB组大鼠血胆固醇、肌酐、尿素氮及尿白蛋白排泄量、内生肌酐清除率较DM组明显减少(P0.01或P0.05);DMB组CTGFmRNA的表达较DM组明显减少(P0.05)。结论苯那普利对糖尿病大鼠肾脏具有

2、部分保护作用，其机制可能是抑制肾脏CTGFmRNA的表达。【关键词】糖尿病肾病;结缔组织生长因子;苯那普利【Abstract】ObjectiveTostudytherenalprotectiveeffectsofbenazeprilindiabeticratsanditsmechanisms.Methods34)andbenazepritreated(DMB)groups.Thelevelsofplasmaglucose,serumcholesterol,serumcreatinine,bloodurianitrogen,urinaryalbumin

3、andthecreatinineclearancerateent.TheexpressionsofCTGFmRNAindiabeticratscholesterol,urianitrogen,creatinineandurinaryalbuminexcretion,creatinineclearancerateinDMBgroupRNAinDMBgrouperenalprotectiveeffectsondiabeticrats.ThismightresultfromdecreasingexpressionsofCTGFmRNAofkidney.【Ke

4、ya公司)，血糖高灵敏度试剂(长春汇力生物工程技术开发中心)，尿葡萄糖检查试纸条(桂林中辉生物技术有限公司)，CTGF及βactin引物序列(北京鼎国生物技术发展公司)，逆转录酶试剂盒(Invitrogen公司)，DNAmarker(Takara公司)。1.3方法1.3.1糖尿病模型的建立将34只大鼠随机分为正常对照组(N组，n=10)、糖尿病未治疗组(DM组，n=12)及DM加苯那普利治疗组(DMB组，n=12)，每组雌雄各半。对DM组及DMB组大鼠一次性腹腔注射STZ50mg/kg，临用前将STZ溶于0.01mol/L枸椽酸缓冲液中(pH4.2)

5、。N组腹腔注射等量生理盐水。72h后测量空腹血糖及尿糖定性，空腹血糖≥16.7mol/L，尿糖定性≥，大鼠多饮、多食和尿量增加者为糖尿病大鼠模型。待血糖稳定1g·kg-1·d-1灌服，共观察12l/min)=尿肌酐÷血肌酐×每分钟尿量。1.3.5大鼠肾脏CTGFmRNA的表达RNA提取：将存放的肾组织用冰盒取出，按Trizol试剂说明书操作。分别取N组、DM组、DMB组的肾脏皮质100mg。提取肾脏组织总RNA，取其中1μg，应用RTPCR方法进行RTPCR反应，CTGF上游引物为：5′CTAAGACCTGTGGAATGGGC3′;下游引物序

6、列为：5′CTCAAAGATGTCATTGCCCCC3′;用引物可扩增出长度为383bp的CTGFcDNA片段;βactin引物序列分别为：上游5′GTGGGCGCTCTAGGCACCAA3′，下游5′CTCTTTGATGTCACGCACGATTTC3′，用引物可扩增出长度为540bp的βactincDNA片段。PCR产物的检测和分析：用1.5%琼脂凝胶电泳分析，紫外灯下拍照，用凝胶成像处理系统对每一标本的PCR产物扩增特异性片段进行灰度扫描，并以βactin作为参考定量标准，数值以两者之间吸光度(Int)×面积(pix)比值表示，以

7、对照组的比值作为标准1.0，计算CTGF基因相对表达量。1.4统计学处理所有数据用x±s表示，采用SPSS11.5软件进行方差分析检测，肾组织半定量分析采用秩和检验。2结果2.1一般状态、体质量及肾质量的变化N组大鼠无死亡，精神状态良好，反应灵敏，动作敏捷，毛色白有光泽;DM组和DMB组均无光泽，部分出现烂尾、烂脚、肢体感染、白内障等合并症。DM组大鼠上述症状明显，且有4只死亡;DMB组有2只死亡，另有1只死于灌胃，且此组上述症状相对较轻。DM组与DMB组大鼠从造模第2周到实验结束，体质量明显低于N组(P0.05、P0.01);DMB组大鼠空腹体质量明

8、显高于DM组(P0.05)。实验第12周末，DM组和DMB组大鼠右肾质量较N组有不同程度增加，