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1、浅谈芒果苷磺酸钠抗白血病的实验分析论文摘要:目的观察芒果苷磺酸钠体内外抗白血病的作用。方法采用MTT法,观察不同浓度芒果苷磺酸钠对K562细胞生长的影响;建立小鼠K562白血病模型,考察芒果苷磺酸钠对K562白血病小鼠的生命延长率。结果不同浓度的芒果苷磺酸钠在不同时间对K562细胞均有抑制作用,并随浓度升高和作用时间延长而抑制作用增强,但其抑制作用稍弱于同浓度的芒果苷;芒果苷磺酸钠能明显提高K562白血病小鼠的生命延长率。结论芒果苷磺酸钠有较好的体内外抗白血病作用。关键词:芒果苷磺酸钠;K562细胞;白血病 Abstract:ObjectiveToobser
2、vetheantileukemiaeffectofmangiferinsulfonatesodiuminvitro1vivo.MethodsTheeffectofdifferentconcentrationsofmangiferinsulfonatesodiumontheproliferationofK562leukemiacellsinedbyMTTassay;1themousesurvivalrateiamodelinmice.ResultsDifferentconcentrationsofmangiferinsulfonatesodiuminhibite
3、dtheK562cellproliferationindifferenttime,theinhibitioneffecte1concentration,butitsinhibitioneffecteconcentrationmangiferin.Mangiferinsulfonatesodiumcouldobviouslyprolongmousesurvivaltime.ConclusionMangiferinsulfonatesodiumhasgoodantilelkemiaeffectinvitro1vivo. Key;K562cell;Leukemia
4、 芒果苷,又名芒果素、知母宁,广泛存在于百合科植物知母,漆树科芒果树、扁桃树的叶、果实和树皮,龙胆科植物东北龙胆、川西獐芽菜,水龙骨科植物光石韦等植物中。芒果苷为芒果叶的主要成分,含量达1.92%[1];芒果苷也为川西獐牙菜的主要成分,它在川西獐牙菜中的含量达0.98%[2]。芒果苷具有多方面的生理活性和药理作用,有止咳、祛痰、平喘及抗炎、免疫、保肝利胆、抗脂质过氧化、抗病毒、抗菌、抗糖尿病和抗肿瘤等作用[3]。 芒果苷还具有抗白血病作用,芒果苷可抑制慢性髓系白血病K562细胞的增殖,并可能通过抑制bcr/abl融合基因的表达诱导K562细胞凋亡[4]。
5、 但芒果苷是一种四羟基的酮碳糖苷(图1),水溶性极差,难以制成合适浓度的稳定药液,影响其疗效及其应用。增加难溶性药物的溶解度以满足治疗需要,是中药制剂的重要问题。前期我们通过结构修饰在芒果苷的4-位引入了-SO3Na(磺酸钠基),制备得到芒果苷磺酸钠盐(如图2),改善了芒果苷的水溶性。本实验通过噻唑兰(MTT)方法研究其对白血病K562细胞株的增殖抑制作用,并通过体内试验验证其抗白血病的作用,为其开发为抗白血病新药提供理论依据。 1材料与仪器 1.1药物EaglesMEM干粉和G148,美国Gibco公司产品;MTT及DMSO,美国Sigama公司产品;L
6、-谷氨酰胺,北科化学试剂公司进口分装;胎牛血清,美国HycloneLab公司产品;卡那霉素,Sigma分装;MEM培养液含10%胎牛血清、0.03%谷氨酰胺,G418380g/ml,卡那霉素50U/ml,pH7.2。细胞消化液含0.25%胰蛋白酶,用D-Hangs配制;环磷酰胺(CTX),江苏恒瑞医药股份有限公司产品,临用时以生理盐水配成2mg/ml的溶液;芒果苷磺酸钠(自制,纯度95%),以生理盐水配制成10,5.0,2.5mg/ml3种浓度的溶液。 图1芒果苷的结构图2芒果苷磺酸钠的结构 1.2细胞株人慢粒白血病细胞株K562购自中国科学院上海细胞生物
7、学研究所细胞库,并由泸州医学院毒理研究所细胞室传代保存。 1.3仪器CO2培养箱(ThermoForma),美国产,型号381;倒置显微镜(Olympus),日本产,型号CK40;酶标仪(Biocel1),奥地利产,型号Sunrise。 1.4动物健康昆明种小鼠,雌雄各半,体质量(20±2)g,由泸州医学院实验动物科提供,合格证号:川实动证第07216号。 2方法 2.1细胞生长抑制试验取对数生长期的K562细胞,调整细胞浓度为5×104/ml,接种于96孔培养板,每孔加20μl细胞液。药物(芒果苷磺酸钠和芒果苷)用培养液配成1mg/ml,实验组均分别
8、以不同终浓度(31.3,62.5,12