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1、芒果苷磺酸钠抗白血病的实验研究论文袁叶飞,邓家刚,胡祥宇,欧贤红【摘要】目的观察芒果苷磺酸钠体内外抗白血病的作用。方法采用MTT法,观察不同浓度芒果苷磺酸钠对K562细胞生长的影响;建立小鼠K562白血病模型,考察芒果苷磺酸钠对K562白血病小鼠的生命延长率。结果不同浓度的芒果苷磺酸钠在不同时间对K562细胞均有抑制作用,并随浓度升高和作用时间延长而抑制作用增强,但其抑制作用稍弱于同浓度的芒果苷;芒果苷磺酸钠能明显提高K562白血病小鼠的生命延长率。结论芒果苷磺酸钠有较好的体内外抗白血病作用。【关键词】芒果苷磺酸钠;K562细胞;白血病Abstract:Obj
2、ectiveToobservetheantileukemiaeffectofmangiferinsulfonatesodiuminvitroandvivo.MethodsTheeffectofdifferentconcentrationsofmangiferinsulfonatesodiumontheproliferationofK562leukemiacellsinedbyMTTassay;andthemousesurvivalrateiamodelinmice.ResultsDifferentconcentrationsofmangiferinsulfon
3、atesodiuminhibitedtheK562cellproliferationindifferenttime,theinhibitioneffecteandconcentration,butitsinhibitioneffecteconcentrationmangiferin.Mangiferinsulfonatesodiumcouldobviouslyprolongmousesurvivaltime.ConclusionMangiferinsulfonatesodiumhasgoodantilelkemiaeffectinvitroandvivo.Ke
4、y;K562cell;Leukemia芒果苷,又名芒果素、知母宁,广泛存在于百合科植物知母,漆树科芒果树、扁桃树的叶、果实和树皮,龙胆科植物东北龙胆、川西獐芽菜,水龙骨科植物光石韦等植物中。芒果苷为芒果叶的主要成分,含量达1.92%1;芒果苷也为川西獐牙菜的主要成分,它在川西獐牙菜中的含量达0.98%2。芒果苷具有多方面的生理活性和药理作用,有止咳、祛痰、平喘及抗炎、免疫、保肝利胆、抗脂质过氧化、抗病毒、抗菌、抗糖尿病和抗肿瘤等作用3。芒果苷还具有抗白血病作用,芒果苷可抑制慢性髓系白血病K562细胞的增殖.freela公司产品;L-谷氨酰胺,北科化学试剂公司进
5、口分装;胎牛血清,美国HycloneLab公司产品;卡那霉素,Sigma分装;MEM培养液含10%胎牛血清、0.03%谷氨酰胺,G418380g/ml,卡那霉素50U/ml,pH7.2。细胞消化液含0.25%胰蛋白酶,用D-Hangs配制;环磷酰胺(CTX),江苏恒瑞医药股份有限公司产品,临用时以生理盐水配成2mg/ml的溶液;芒果苷磺酸钠(自制,纯度95%),以生理盐水配制成10,5.0,2.5mg/ml3种浓度的溶液。图1芒果苷的结构图2芒果苷磺酸钠的结构1.2细胞株人慢粒白血病细胞株K562购自中国科学院上海细胞生物学研究所细胞库,并由泸州医学院毒理研究
6、所细胞室传代保存。1.3仪器CO2培养箱(ThermoForma),美国产,型号381;倒置显微镜(Olympus),日本产,型号CK40;酶标仪(Biocel1),奥地利产,型号Sunrise。1.4动物健康昆明种小鼠,雌雄各半,体质量(20±2)g,由泸州医学院实验动物科提供,合格证号:川实动证第07216号。2方法2.1细胞生长抑制试验取对数生长期的K562细胞,调整细胞浓度为5×104/ml,接种于96孔培养板,每孔加20μl细胞液。药物(芒果苷磺酸钠和芒果苷)用培养液配成1mg/ml,实验组均分别以不同终浓度(31.3,62.5,125,250,50
7、0μg/ml)芒果苷磺酸钠和芒果苷处理,另设对照组(不加药)和空白组(只加培养液),每组设4个复孔,培养24,48,72和96h后,加入MTT10μl,4h后,离心弃上清液,每孔加入DMSO150μl,轻轻振荡,待结晶完全溶解,10min后,在酶标仪上以波长为550nm,参比波长为450nm测定OD值,计算平均抑制率,并以改良寇式法计算半数抑制浓度IC505,实验重复3次(n=12)。按如下公式计算抑制率和IC50:抑制率(%)=(对照组平均OD值-实验组平均OD值)/对照组平均OD值;IC50=lg-1Xm-i(∑p-0.5),式中Xm:设计的最大浓度的对数
8、值;i:相邻两组浓度对数值之差;∑p: