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《芒果苷磺酸钠抗白血病的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、芒果苷磺酸钠抗白血病的实验研究【关键词】芒果苷磺酸钠;K562细胞;白血病 Abstract：ObjectiveToobservetheantileukemiaeffectofmangiferinsulfonatesodiuminvitroandvivo.MethodsTheeffectofdifferentconcentrationsofmangiferinsulfonatesodiumontheproliferationofK562leukemiacellsinedbyMTTassay;andthemousesurvivalrateiamodelinmice.ResultsDiff
2、erentconcentrationsofmangiferinsulfonatesodiuminhibitedtheK562cellproliferationindifferenttime,theinhibitioneffecteandconcentration,butitsinhibitioneffecteconcentrationmangiferin.Mangiferinsulfonatesodiumcouldobviouslyprolongmousesurvivaltime.ConclusionMangiferinsulfonatesodiumhasgoodantilelkemia
3、effectinvitroandvivo. Key;K562cell;Leukemia 芒果苷,又名芒果素、知母宁,广泛存在于百合科植物知母,漆树科芒果树、扁桃树的叶、果实和树皮,龙胆科植物东北龙胆、川西獐芽菜,水龙骨科植物光石韦等植物中。芒果苷为芒果叶的主要成分,含量达1.92%[1];芒果苷也为川西獐牙菜的主要成分，它在川西獐牙菜中的含量达0.98%[2]。芒果苷具有多方面的生理活性和药理作用，有止咳、祛痰、平喘及抗炎、免疫、保肝利胆、抗脂质过氧化、抗病毒、抗菌、抗糖尿病和抗肿瘤等作用[3]。 芒果苷还具有抗白血病作用，芒果苷可抑制慢性髓系白血病K562细胞的增殖，并可能通过抑
4、制bcr/abl融合基因的表达诱导K562细胞凋亡[4]。 但芒果苷是一种四羟基的酮碳糖苷(图1),水溶性极差,难以制成合适浓度的稳定药液,影响其疗效及其应用。增加难溶性药物的溶解度以满足治疗需要,是中药制剂的重要问题。前期我们通过结构修饰在芒果苷的4-位引入了-SO3Na(磺酸钠基),制备得到芒果苷磺酸钠盐(如图2),改善了芒果苷的水溶性。本实验通过噻唑兰(MTT)方法研究其对白血病K562细胞株的增殖抑制作用,并通过体内试验验证其抗白血病的作用，为其开发为抗白血病新药提供理论依据。 1材料与仪器 1.1药物EaglesMEM干粉和G148，美国Gibco公司产品;MTT及DMS
5、O，美国Sigama公司产品;L-谷氨酰胺，北科化学试剂公司进口分装;胎牛血清，美国HycloneLab公司产品;卡那霉素，Sigma分装;MEM培养液含10%胎牛血清、0.03%谷氨酰胺，G418380g/ml，卡那霉素50U/ml，pH7.2。细胞消化液含0.25%胰蛋白酶，用D-Hangs配制;环磷酰胺(CTX)，江苏恒瑞医药股份有限公司产品，临用时以生理盐水配成2mg/ml的溶液;芒果苷磺酸钠(自制，纯度95%)，以生理盐水配制成10，5.0，2.5mg/ml3种浓度的溶液。 图1芒果苷的结构图2芒果苷磺酸钠的结构 1.2细胞株人慢粒白血病细胞株K562购自中国科学院上海细胞
6、生物学研究所细胞库,并由泸州医学院毒理研究所细胞室传代保存。 1.3仪器CO2培养箱(ThermoForma)，美国产，型号381;倒置显微镜(Olympus)，日本产，型号CK40;酶标仪(Biocel1)，奥地利产，型号Sunrise。 1.4动物健康昆明种小鼠,雌雄各半，体质量(20±2)g，由泸州医学院实验动物科提供，合格证号：川实动证第07216号。 2方法 2.1细胞生长抑制试验取对数生长期的K562细胞,调整细胞浓度为5×104/ml,接种于96孔培养板,每孔加20μl细胞液。药物(芒果苷磺酸钠和芒果苷)用培养液配成1mg/ml,实验组均分别以不同终浓度(31.3，
7、62.5，125，250，500μg/ml)芒果苷磺酸钠和芒果苷处理,另设对照组(不加药)和空白组(只加培养液),每组设4个复孔,培养24，48，72和96h后,加入MTT10μl,4h后,离心弃上清液,每孔加入DMSO150μl，轻轻振荡,待结晶完全溶解,10min后,在酶标仪上以波长为550nm，参比波长为450nm测定OD值,计算平均抑制率,并以改良寇式法计算半数抑制浓度IC50[5]，实验重复3次(n=12)。按如下公式计算
