饲料添加南极磷虾肽后对斑马鱼的生长影响

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时间:2018-05-01

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1、饲料添加南极磷虾肽后对斑马鱼的生长影响  南极磷虾肽是将去壳后的南极磷虾肉通过生物酶解作用,将大分子的蛋白质进行降解成为多肽。多肽可分为营养型多肽和功能型多肽。营养型多肽提供生物每天所需的各种氨基酸,既有利于氨基酸的吸收和利用的沉积,又能促进吸收矿物质;而功能型多肽可影响生物体内许多重要生理生化功能,如抗菌抗炎等免疫调节活性、抗氧化活性和促进生长活性等。免疫调节多肽多为小分子环肽,含有丰富的羟基酸、β-氨基酸和D型氨基酸等,有些还含有烯键和炔键,使得多肽的生物利用度和稳定性大大提高。  目前已经通过体外酶解的方

2、法制备出具有生物活性的南极磷虾肽。南极磷虾肉的酶解液经浓缩和喷雾干燥后,得到淡黄色且具虾香味的干燥粉末,其主要成分多肽含量在87.32%;并利用牡蛎壳粉作为脱氟材料的静态吸附试验,脱氟效率可达95.64%,同时证明其具有较好的清除自由基能力。  目前,已证实南极磷虾酶解多肽具有抑菌活性。另外,免疫增强剂也能提高鱼体抗体水平,增强鱼类特异性免疫应答水平。因此,南极磷虾肽作为动物的生物活性物质,可作为鱼类免疫增强剂,在促进鱼类摄食、促进生长和提高免疫力等多方面发挥多方面的积极作用。试验通过研究添加南极磷虾肽后对斑马鱼的生长指

3、标和生理及生化指标的影响,旨在探讨鱼类饲料中适宜的南极磷虾肽添加量,为配制更高效率的鱼类饲料配方提供理论支持。  1材料与方法    1.1试验饲料  试验饲料是在基础日粮中分别额外添加质量比为1.0%、2.5%及5.0%的南极磷虾肽,按顺序分别记为D1、D2和D3。用木瓜蛋白酶酶解去壳南极磷虾肉,然后超滤离心,去除相对分子质量大于10000的蛋白后获得南极磷虾肽溶液,采用福林酚法测定多肽含量。基础日粮配方按照对角线法设计各组分的比例。试验饲料原料按配方称质量,均匀混合,然后试验组饲料按配方加入南极磷虾肽,不添加南极磷虾

4、肽的饲料为对照组饲料。所有饲料烘干粉碎后过20、40和60目筛,制成颗粒直径在0.3~0.45mm的小颗粒和0.45~0.9mm的大颗粒饲料。采用105℃恒温烘干失水法测定水分,采用凯氏定氮法测定粗蛋白含量,采用600℃灼烧法测定灰分,采用索氏提取法测定粗脂肪含量,采用氟电极法测定氟含量。饲料配方及营养成分见表1。【表1】    1.2试验设计及饲养管理  共设立1个对照组,3个试验组。对照组投喂不添加南极磷虾肽的饲料,试验组投喂试验饲料。  试验用斑马鱼均购自青岛市南区南山路花鸟鱼市场,1.5月龄斑马鱼,共300条。试

5、验开始前先驯养1周,去除体形弱小的鱼。喂养阶段开始时随机挑选其中240条,每组60条,测量并记录每条试验用斑马鱼的体长和体质量。喂养时间为8周,每日饲料投喂量为体质量的5%,投喂2次(早上08:30,下午17:30),养殖期间保持水温在25~27℃,养殖期间采用部分换水法。每隔2周进行1次阶段检测,每组随机采样30条鱼,记录体长及体质量。  在检测各项终期指标前,所有试验用鱼均禁食1d。然后测量每条鱼的体长和体质量。采集肌肉和骨骼样本,-20℃保存备用。采集血液并用肝素抗凝,一部分血液样本离心(1000r/min,10m

6、in),分离红细胞和血浆,并立即用于超氧化物歧化酶(SOD)检测,另一部分血液样本用于血红蛋白含量测定。血细胞计数的血样在采集后立即计数,用于红细胞计数的血样用鱼类氯化钠注射液稀释200倍,用于白细胞计数的血样用白细胞稀释液稀释200倍。  1.3各项指标检测及方法  1.3.1鱼体生长指标及饲料效率的测定体长增长率/%=(Lt-L0)/L0100增重率/%=(es;100特定增长率/(%d-1)=(lnes;100/t饲料系数=F/(es;100蛋白质效率/%=(es;P)100内脏质量比/%=es;100肥满度=10

7、0es;es;100其中,Ln:喂养结束时鱼体长;g/kg,高出对照组2.24倍;D2组骨骼含氟量为85.23mg/kg,高出对照组3.51倍;D3组骨骼含氟量为213.32mg/kg,高出对照组8.8倍。  2.3添加南极磷虾肽对斑马鱼繁殖力的影响【表4】    从表4可见:随着南极磷虾肽添加量的增加,各个试验组的绝对繁殖力均呈现逐步下降的趋势,并且均低于对照组,结果差异显着(P<0.05)。各组的怀卵量计数结果显示,D1组的雌鱼的最大怀卵量为285粒,D2组的雌鱼的最大怀卵量为187粒,D3组的雌鱼的最大怀卵量为69

8、粒,均低于对照组的最低怀卵量288粒。各试验组的成熟系数明显低于对照组。南极磷虾肽添加量越大,这种降低的趋势越明显。  3讨论  因为生物不能直接利用蛋白质,所以必须先在消化系统中消化分解为小分子的短肽和氨基酸才能够被吸收利用。多肽类作为添加剂加入到饲料中,也会促进鱼类摄食,从而提高增长率。  试验中,各个对照组的增

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