联合检测甲胎蛋白异质体和甲胎蛋白诊断肝细胞癌

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1、联合检测甲胎蛋白异质体和甲胎蛋白诊断肝细胞癌　　肝细胞癌(HCC)是临床常见的恶性肿瘤之一，其发病早期十分隐匿，恶性程度高，进展快且预后差，早期诊断对其治疗和预后判断有重要意义。于肝细胞癌(HCC)的AFP和于慢性肝炎和肝硬化的AFP与凝集素LCA的亲和力不同［1］。依据这种亲和力的差别，AFP分为三类，AFP-L1，AFP-L2和AFP-L3。AFP-L1是慢性肝炎和肝硬化患者血清中AFP的主要组成部分，AFP-L2来自于孕妇，AFP-L3于肝癌细胞，与LCA结合力高，在肝癌的早期，尤其是肿瘤组织有足够的肝动脉供给时，能合成分泌AFP-L3。A

2、FP-L3是HCC患者血清中最主要的AFP异质体，联合检测甲胎蛋白异质体和甲胎蛋白对肝细胞癌(HCC)，慢性肝炎和肝硬化的患者鉴别诊断非常重要。我们收集了108例患者资料并进行分析，现报告如下。　　1资料与方法　　1．1资料于2011年5月－2012年12月在金坛市人民医院就诊的肝细胞癌(HCC)患者30例，男77例，女31例，年龄27～82岁。均经组织病理学或影像学证实;慢性肝病患者78例，诊断标准符合2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会，肝病学分会联合修订的病毒性肝炎防治方案中病毒性肝炎诊断标准。　　1．2方法血清AFP-L3分离检测采

3、用亲和微量离心纯化柱法，该微量离心纯化柱内装偶联了小扁豆凝集素LCA的琼脂糖，可以特异结合AFP-L3，经过离心洗脱获得AFP-L3，试剂由北京热景生物技术有限公司提供，以美国食品药品管理局批准的AFP-L3%≥10%为诊断HCC的临界值标准;获得的AFP－L3，AFP采用微粒子化学发光免疫法，仪器采用贝克曼公司的dxi800全自动微粒子化学发光免疫分析仪，使用海尔施公司提供的同型配套试剂盒，试剂均在有效期内使用，AFP正常值设定为0～10ng/ml，检测时插入定值质控，具体操作步骤严格按照说明书进行，确保检验结果的准确性。108例患者均于

4、晨起空腹静脉采血5ml，无溶血，脂血，新鲜分离血清，首先采用亲和微量离心纯化柱法获取AFP-L3，然后采用贝克曼公司的dxi800全自动微粒子化学发光免疫分析仪检测AFP-L3和血清中的AFP。换算出AFP-L3%。　　1．3统计学方法应用SPSS13．0软件进行统计分析，不同组间比较采用χ2检验，以P＜0．05为差异有统计学意义。　　2结果　　当检测结果显示获取AFP-L3含量≥1ng/ml时，按照北京热景生物技术有限公司提供的试剂说明书中的公式换算出AFP-L3的比率。当检测结果显示标本中AFP-L3含量≤1ng/ml时，

5、无需计算AFP-L3的比率，即为阴性结果。当检测结果显示AFP-L3含量≥400ng/ml时，即待测标本中甲胎蛋白异质体的含量≥1000ng/ml，可判定阳性结果≥10%。　　30例HCC患者中AFP的水平波动在8．8～1524．1ng/ml之间，其中AFP-L3%的阳性率为80%，而在78例慢性肝病患者中AFP的水平波动在3．2～580．1ng/ml之间，AFP-L3%的阳性率为14．1%。【1】　　　　3讨论　　随着人们对肿瘤发病机制研究的深入，新的标志物不断被发现，FDA于2005年批准检测甲胎蛋白异质体(AFP-L3)应

6、用于肝癌诊断，并把甲胎蛋白异质体(AFP-L3)占总甲胎蛋白(AFP)比率≥10%，作为诊断肝细胞癌的阳性界定值。　　随着国内微量离心柱法检测AFP-L3%的建立，血清中总AFP和AFP-L3%可以提供不同的关于肝癌的信息。总AFP升高可能提示肝癌患者肝脏有大的瘤块存在。AFP-L3%可以预测肝癌细胞的恶性程度。AFP-L3%为低值时不能否定HCC的存在，因为约有15%～30%的AFP阳性HCC的AFP-L3%＜10%。　　目前原发性肝癌诊断的血清标志物仍首推AFP，然而约有35%～40%原发性肝癌患者血清AFP呈低浓度升高，且小肝癌通常A

7、FP较低，甚至正常。因此AFP持续低浓度阳性对早期肝癌患者的及时诊断尤为重要，低浓度持续阳性患者需经过动态观察AFP的变化，但这种长期随访的方法往往延误诊断的时机而造成失去及时治疗的良机，因此有些学者认为传统AFP诊断标准对HCC诊断价值不大，本文应用亲和微量离心纯化柱法检测30例原发性肝癌，78例慢性肝病的血清中AFP和AFP-L3%结果，HCC组AFP-L3%的阳性率较慢性肝病组差异有非常显着性(P﹤0．01)，尤其是在AFP浓度较低时HCC组AFP-L3%的阳性率明显高于慢性肝病组，而在AFP高浓度时HCC组的AFP-L3%阳性率也明显高于

8、慢性肝病组，说明AFP-L3%对HCC有更高的敏感性．从表3可以看出，单独分析AFP对HCC的准确度是73．82%，单独分析AFP-L3