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《定喘汤对哮喘大鼠肺组织和胸腺神经生长因子表达的影响 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、定喘汤对哮喘大鼠肺组织和胸腺神经生长因子表达的影响李杰,伍参荣,陈伶利,李继红,姜晓,陈北阳【摘要】目的探讨定喘汤对哮喘大鼠肺组织及胸腺神经生长因子(NGF)表达的影响。方法将,Changsha410007,ChinaAbstract：ObjectiveToexploretheeffectofDingchuantangontheexpressionofNGFinthelungandthymusofasthmaticrats.MethodsThirtytlydividedintocontrolgroup,asthmaticgroup,Dingchuantanggroupa
2、ndBeclomethasonegroup,8ratsforeachgroup.Asthmaticmodeladeexceptthecontrolgroup.ThechangeofNGFexpressioninthelungandthymuseansofimmunohistochemistry.ResultsTheexpressionofNGFinthelungandthymusofasthmaticgroupuchhigherthanthatofcontrolgroupandthatofDingchuantanggroupuchloaticgroup.Conclusi
3、onOver-expressionofNGFmightbeinvolvedinthepathogenesisofbronchialasthma,andinhibitionofNGFexpressionbyDingchuantangmaybeoneofthemechanismsinthetreatmentofasthma. Keyus；asthma；rat支气管哮喘是一种严重威胁人类健康的慢性呼吸道疾病,近年来其发病率和病死率呈上升趋势。在哮喘发病机制中,免疫细胞与神经元之间存在着广泛的联系,而神经生长因子(NGF)则可能是参与这一免疫神经机制的重要介质。中医药防治本病
4、具有较好的临床疗效,但其治疗机理研究尚不深入。本研究通过观察哮喘大鼠肺组织和胸腺NGF表达及定喘汤对NGF表达的影响,探讨NGF在哮喘发病机制中的作用及定喘汤的平喘机制,为哮喘的治疗提供新的依据。 1实验材料 1.1动物a公司产,北京天象人生物工程公司分装进口；NGF免疫组化试剂盒,武汉博士德生物工程公司提供。 1.3仪器超声雾化器为北京亚都YD-800型；多功能酶标仪为华东电子集团公司。 2实验方法 2.1分组和造模按随机原则分为正常对照组、模型组、定喘汤组、必可酮组,每组8只。参照文献[1]方法,腹腔注射1mL(50μg)OVA和10μg氢氧化铝悬液,1周
5、后再注射1次,第4日后用10%OVA雾化吸入(每日1次,每次8～10min,共12次),激惹大鼠。正常对照组吸入生理盐水,腹腔注入10μg氢氧化铝悬液。 2.2给药与标本采集定喘汤组从第1次诱喘后每日用定喘汤的水煎液喷雾,每日2次。必可酮组每日用必可酮喷雾,每日2次。正常对照组用生理盐水灌胃。从首次诱喘到治疗结束共15d,将大鼠用乌拉坦(1g/kg)肌肉注射麻醉后,常规消毒。沿颈正中线剪开皮肤,切开气管,结扎右支气管,插管,用生理盐水灌洗4次,每次3mL,回收全部的支气管肺泡灌洗液(BALF)6.5mL,4℃条件下,1000r/min离心10min,去上清液,-70℃
6、保存。取胸腺和肺组织保存待用。 2.3观察指标 2.3.1支气管肺泡灌洗液中嗜酸粒细胞计数 采用瑞氏姬姆沙染色,镜下计数200个白细胞数中的嗜酸粒细胞(EOS),求出百分率,进行统计分析。 2.3.2肺组织和胸腺神经生长因子的测定 用4%多聚甲醛0.1mL/molPBS灌流固定后取下肺组织和胸腺,固定24h后,移至30%的蔗糖缓冲液中,至标本沉底,OCT包埋,恒冷箱连续切片(片厚16μm),冷风干燥后进行免疫组化染色(SABC法)。用图像分析系统对实验结果进行分析,计算光密度值。 3统计学方法 用SPSS14.0统计软件对数据进行统计分析；多样本均数比较及
7、两两比较分别采用F检验和t检验。 4结果 (见表1、表2)表1定喘汤对大鼠BALF中EOS数的影响(略)注：与模型组比较,*P＜0.05(下同)表2各组大鼠肺组织和胸腺NGF阳性反应产物平均光密度值比较(略) 5讨论支气管哮喘是由肥大细胞、EOS和T细胞等多种炎性细胞及介质作用引起的呼吸系统疾病,其主要特征为慢性气道炎症、气道反应性增高以及间歇性可逆行的气道堵塞。NGF是神经元细胞生长和分化的营养因子,近来发现NGF能影响机体的免疫系统,与变态反应性和炎症性疾病的发病有关[2]。NGF的产生一般由神经系统细胞产生,但在炎症条件下,大
