阿司匹林对mcf7细胞upa表达的影响

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1、阿司匹林对MCF7细胞uPA表达的影响【摘要】目的观察阿司匹林对乳腺癌细胞MCF7增殖的影响，探讨阿司匹林新的抗肿瘤作用机制。方法MTT法检测不同浓度的阿司匹林(2.5、5.0和10.0mmol/L)作用于人乳腺癌细胞株MCF7不同时间(24、48和72h)的细胞增殖抑制率；应用CF7乳腺癌细胞尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂(urokinasetypeplasminogenactivator,uPA)表达。结果阿司匹林各剂量组细胞增殖抑制率随药物浓度的增加、作用时间的延长而提高(P＜0.01)；MCF7细

2、胞uPA的蛋白表达量随药物浓度的增加、作用时间的延长而降低。结论阿司匹林有抑制人乳腺癌细胞MCF7增殖的作用,并且呈时间依赖性和剂量依赖性；阿司匹林可以抑制MCF7细胞的uPA表达，这可能是阿司匹林抗乳腺癌的分子机制之一。【关键词】阿司匹林；尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂；乳腺癌细胞MCF7【Abstract】ObjectiveToexplorethemolecularmechanismofantitumoreffectsofaspirinonbreastcancercellMCF7.MethodsTh

3、ehumanbreastcancercellMCF7mol·L-1aspirinfor24,48,and72hrespectively,theinhibitoryeffecteanddosedependentmanner(P＜0.01).TheexpressionofuPA　decreasedaftertreatedeanddosedependence.ConclusionAspirinhasinhibitoryeffectsonthegroanbreastcancercellMCF7inadoseand

4、timedependentmanner,andinhibitstheexpressionofuPAinbreastcancercells,olecularmechanismsofaspirininbreastcancer.【Keyinogenactivator,humanbreastcancercellMCF7非甾体类消炎药(Nonsteroidantiinflammatorydrugs，NSAIDs)在肿瘤防治中的作用越来越受到重视。在对结肠癌、胃癌、食管癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤的基础和临

5、床研究中发现，NSAIDs对上述肿瘤均有明显的抑制作用［１，２］。然而，以往的研究方向主要集中在NSAIDs通过对环氧化酶2(cyclooxygenase2，COX2)的抑制，进而达到对恶性肿瘤的控制［3,4］。尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinasetypeplasminogenactivator，uPA)在肿瘤血管生成过程中发挥着重要的作用，在乳腺癌中有较高的表达。本研究通过观察阿司匹林作用于MCF7细胞后uPA表达的变化，进一步探讨阿司匹林对人乳腺癌细胞的生物学效应和可能的作用机制。1材料与方法

6、1.1材料①主要试剂:阿司匹林购于阿斯利康制药有限公司；阿霉素购于浙江海正药业；鼠抗人单克隆uPA抗体(DataSheet公司)。②细胞株：MCF7细胞株(中科院上海细胞所)。常规培养于含有10%小牛血清、100u青霉素，100u链霉素的LDMEM培养液中，37℃、5%CO2培养箱中贴壁培养，当细胞生长至80%融合时，0.25%胰蛋白酶消化传代。1.2MTT法检测阿司匹林对乳腺癌细胞增殖的抑制率取对数生长期的MCF7细胞，按传代方法制成单细胞悬液，计数，接种于96孔培养板，每孔加细胞悬液100μl(相当于

7、1×104个细胞)，取不含细胞的培养液作为空白调零。将培养板置于37℃、5%CO2培养箱中贴壁培养24h后，各孔分别加入含终浓度为2.5、5.0和10mmol/L阿司匹林及含终浓度为0.5、1.0和2.0μmol/L阿霉素（阳性对照组）的培养液，以不含药物的培养液作为阴性对照组，每组设3个复孔。分别培养24、48和72h后每孔加0.5%MTT20μl，继续培养4h后，小心吸除孔内液体，每孔加二甲基亚砜100μl，震荡10min后，用酶标仪在490nm波长处测定各孔的吸光度值(A值)。按下式计算细胞增殖的抑制率:

8、抑制率(%)=(1－实验组平均A值/对照组平均A值)×100%。1.3CF7细胞uPA表达量与阿司匹林浓度和作用时间相关，阿司匹林能降低MCF7细胞uPA的表达。3讨论近年来，在NSAIDs临床应用与研究的同时，人们发现其有防治肿瘤的作用。1982年Doubilet首次报道了长期服用阿司匹林的人群较普通人群结直肠癌的发病率明显降低，此后数项大样本流行病学研究都得出了类似的结论。据美