流式细胞术在精子质量检测中的应用

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1、维普资讯http://www.cqvip.com中华检验医学杂志2006年6月第29卷第6期ChinJLabMed，June2006，Vol29，No．6．形态学诊断研究．流式细胞术在精子质量检测中的应用华咏钱宪明陈炳官杨建华吴晓云马亮陈翠玲【摘要】目的研究流式细胞检测方法在精子质量评价中的应用。方法将104例男性不育患者的精子标记相应的荧光染料，用流式细胞仪检测精子的质膜完整性、染色质状态、顶体状态和线粒体膜电位等，并与精液常规检测方法进行比较和相关性分析。结果男性不育患者精子质膜完整率为(54．20±21．23)％，染色质结构分析t：(37．78±22．78)％，SDt

2、：(44．24±14．58)％，COMPt：(26．24±21．42)％，线粒体膜电位正常率(50．22±18．36)％，活精子的顶体率(25．27±12．08)％，相关性分析结果表明精子的线粒体膜电位与其活动率(a+b)％存在正相关性(P=0．0002)。结论流式细胞术与常规检测方法相比，不仅具有快速、精确的优点，还可以了解精子的内部结构和功能，是评价精子质量的有效方法。【关键词】精子；流式细胞术FlowcytometryforevaluationofspermqualityHUAy0，lg，QIANXian—ming，CHENBing—gttan，YANGJian—hu

3、a，WUXiao—yun，MALiang，CHENCui—ling．CentralLaboratoryofShanghaiEASTHospitalAfiliatedtOro,~iUniversityofShanghai，Shanghai200120，China【Abstract】objectiveToinvestigatethefunctionofflowcytometryinspermqualityevaluation．MethodsThemembraneintegrity，thechromatinstructure，theacrosomereactionandmitoc

4、hondrialmembranepotential(MMP)ofspermsamplesfrom1o4infertilemalepatientswereanalyzedusingfluorescencemicroscopeandflowcytometry(FCM)，andresultswerecomparedwiththoset}lthespermroutinedetectionmethods．ResultsTherateofspermmembraneintegritywas(54．20±21．23)％．Spermchromatinstructureassay(SCSA)s

5、howedthatt：(37．78±22．78)％，SDt：(44．24±14．58)％，C0MPt：(26．24±21．42)％．TherateofspermswithnormalMMPwas(50．22±18．36)％andthemeanrateofspermswithacrosomewas(25．27±12．08)％．ThecorrelationanalysisshowedthatMMPofspeIn'iswaspositivecorrelatedwiththemotility(a+b)％(P=0．O0o2)．ConclusionTheflowcyt0metryiSm

6、orerapidandmoreaccuratethantheroutinespermdetectionmet}lodsinthespermmlalityevaluationandiSanefectivemet}lodforevaluatingthespermquality．thwhichthestructureandt}lefunctioninsidethespeIn'iscanalSObeunderstood．【Keywords】Spermatozoa；Flowcytometry精子质量检测是诊断男性不育症的重要手段，kit购自美国BDPharmingen公司，碘化丙锭目

7、前的检测方法只能反映精子的外部特征和有限的(propidiumiodide，PI)、吖啶橙(acridineorange，功能。对此，我们将流式细胞术(flowcytometry，AO)、花生凝集素(PNA—FITC)购自Sigma公司。仪FCM)应用于精子质量检测，为精子内部结构和功能器有流式细胞仪(美国BD公司，具有488nm激发的检测提供了一个新的途径和前景。波长的FACSCalibur)、荧光显微镜、正置显微镜(日本OLYMPUS)和精子分析系统(安琪AQ-2000)。对象和方法3．精子FCM检测：各指标的