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《trail联合顺铂对前列腺癌细胞du145杀伤作用的实验研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、TRAIL联合顺钴对前列腺癌细胞DU145杀伤作用的实验研宄(1哈尔滨医科大学基础医学院免疫教研室黑龙江哈尔滨150081)(2黑龙江省农垦总局疾病预防控制中心黑龙江哈尔滨150090)目的：研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactorrelatedapoptosisinducingligand,TRAIL)和顺铀对前列腺癌细胞的杀伤作用及其协同作用。方法：选用前列腺癌细胞株DU145,将生长良好的细胞接种于96孔培养板，培养24h后用顺铂(l,5,10μg/ml)和TRAILC10,100
2、,1000ng/ml)分别/联合作用24h,倒置显微镜下观察细胞的形态变化，然后用MTT法测定细胞的生长抑制率。结果••(1)细胞形态变化:(100,1000ng/ml)的TRAIL组、(5,10μg/ml)的顺铂组、以及上述浓度的TRAIL和顺铂联合用药组部分细胞变圆，从培养皿壁脱落，核/浆比例增大，胞浆颗粒增多，胞核有皱缩变形，大小不均。上述改变的程度随着药物浓度的增加而加重。(2)细胞生长抑制率：细胞生长抑制率10ng/mLTRAIL和lμg/mL顺铂对DU145的生长抑制率和不用药组比较无显著性差异(P&
3、gt;0.05};(100,1000}ng/mLTRAIL和(5,10)μg/mL顺铂对DU145的生长抑制率显著高于阴性对照组(P<0.05),而且随着TRAIL和顺铂浓度的升高、生长抑制率显著增高(P<0.05);(100,1000)ng/mL的TRAIL和(5,10)μg/mL的顺铂分别联合作用对DU145的抑制率均高于单独给药组(P<0.05);10ng/mL的TRAIL单独用药对DU145的抑制作用虽不显著(P>0.05),但和(5,10)μg/mL顺铂联合用药均能加强后者
4、对DU145的抑制作用(P<0.05)。结论：TRAIL和顺铂在杀伤前列腺癌细胞时存在协同作用。【关键词】TRAIL；顺铂；前列腺癌细胞；协同作用R730.5A1007-8231(2016)24-0073-02TRAIL是新发现的肿瘤坏死因子超家族成员，其受体广泛表达于人体组织器官。TRAIL及其受体在诱导肿瘤细胞凋亡的同时能保护正常细胞而免于细胞毒副反应［1］，提示TRAIL可能成为一种新的抗肿瘤药物［2］。化疗药物与TRAIL联合使用吋，可提高肿瘤细胞的凋亡率，这已在膀胱癌、直肠癌等恶性肿瘤的体内、体外实验中得到证
5、实，但其两者对前列腺癌是否也存在协同作用，文献中却鲜冇报道。本研究应用TRAIL和化疗药物顺铂联合作用DU145,观察苏细胞形态及生长抑制率的变化，以初步探讨TRAIL和顺铂在杀伤前列腺癌细胞上是否存在协同作用，为进一步的机制研究和临床应用提供实验依据。1.材料与方法1.1实验材料前列腺癌DU145细胞株，TRAIL均由日本富山人学提供，顺铂购自SelleckChemicals（美国），二苯基四氮唑溴盐（MTT）、二甲基亚砜（DMSO）购自Sigma（美国），RPMI1640培养液购自Gibco（美国）。1.2实验方法1.2
6、.1细胞培养DU145用含10%胎牛血清、100U/mL青霉素、100mg/L链霉素的RPMI1640培养液，于37°C、5%CO2饱和湿度细胞培养箱内常规培养。1.2.2MTT法测定细胞抑制率将生长良好的DU145调至浓度为l×105/L,接种于96孔培养板，每孔100μL，培养24h后换成含不同浓度的顺铂（1、5、10μg/mL）、TRAIL（10、100、1000ng/mL）的培养液继续培养，每个浓度组设3个复孔，并设阴性对照组（不加顺铂和TRAIL）和空白对照组（不接种细胞，只加培养液），24
7、h后倒置显微镜下观察细胞形态的变化，然后加入5g/L的MTT溶液20μL/孔，继续培养4h,轻轻吸弃每孔中培养液，保留孔底部的沉淀，再加入DMSO150μL/孔，轻轻振荡摇匀后用酶标仪测其吸光度（A值），测量波长570nm，参考波长690nm，重复检测3次。计算其生长抑制率（CI）=（阴性对照组A值-试验组A值）/阴性对照组A值×100%。联合用药方法：将上述单独作用的各浓度TRAIL和顺铂分别进行两两联合作用，苏余步骤同上。1.2.3统计方法实验数据均用x-±s表示，SPSS10.0统
8、计软件，采用方差分析法进行处理。1.结果2.1细胞形态变化倒置显微镜下，10ng/mLTRAIL组、lμg/mL顺铂组的细胞形态和阴性对照组无明显差异：细胞呈梭形，贴壁良好，胞浆透亮且颗粒少，核圆k均匀。(100,1000)ng/mLTRAIL组、(5,10)μg/mL的顺铂组
