洛铂联合放疗对肺癌细胞杀伤作用的研究

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1、隶．初大·粤硕士学位论文洛铂联合放疗对肺癌细胞杀伤作用的研究2012年05月22日StudyofeffectonlungcancercellA549treatedbylobaplatincombinedwith1●J●racIlatlonADissertationSubmittedtoSoutheastUniVersi够FortheMasterDegreeofMedicineBYTAOHuaSuperVisedbyAssociateProfessorSunXin．chenSchoolofmedicineSoutheastUniVersityMay，2012东南大学学位论

2、文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查

3、阅和借阅，可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。论文的公布(包括刊登)授权东南大学研究生院办理。研究生签名：中文摘要洛铂联合放疗对肺癌细胞杀伤作用的研究东南大学临床医学院研究生：陶华导师：孙新臣摘要目的：肺癌是世界范围内最为常见的恶性肿瘤之一。非小细胞肺癌占所有肺癌的80％。肺癌的发病较隐匿，往往发现时已是晚期，失去手术机会，而放疗则给不能手术的肺癌患者带来了治愈的希望。但大多数肺癌患者体内微转移灶的存在以及肿瘤负荷大等原因使得单纯放疗收效甚微。因此，放，化疗联合治疗成为不能手术和中晚期肺癌的主要治疗手段。本实验主要研究洛铂与放疗在非小细胞肺癌治疗上是否有协同增效作

4、用，从而为洛铂与放疗联合在肺癌中的应用提供相应的理论基础和实验依据。方法：以对数生长期的人肺腺癌A549细胞为研究对象。1、设空白对照组和洛铂浓度从O．000167uM～30uM共12个组。采用MTT(噻唑蓝比色)法观察不同浓度洛铂／单独放疗对肺癌A549细胞增殖抑制作用；2、洛铂联合放疗对肺癌A549细胞体外增殖活性的影响；3、流式细胞仪检测洛铂±放疗对肺癌A549细胞周期分布的影响；4、流式细胞仪检测洛铂±放疗对肺癌A549细胞凋亡的影响；5、蛋白免疫印迹检测Bcl一2和Bax蛋白表达。结果：l、洛铂／单独放疗对肺癌A549细胞有增殖抑制作用，且细胞毒性呈剂量依赖性

5、，单用洛铂的IC50值为3．884uM，根据实验结果采用4Gy钴60放疗剂量作为联合治疗的干预放疗剂量；2、洛铂联合放疗能观察到明显的抗肿瘤生长作用，其IC50值为0．1729uM；3、流式细胞仪检测洛铂将肺癌A549细胞阻断于S期，而洛铂联合放疗将肺癌A549细胞阻断于G2／M期；4、流式细胞仪检测洛铂联合放疗较单独放疗和单用洛铂有更高的细胞凋亡率；5、蛋白免疫印迹结果显示洛铂联合放疗组Bc卜2表达水平下降，促进凋亡诱导蛋白Bax表达水平升高。结论：洛铂有放疗增敏作用，作用机制可能与抑制Bc卜2表达，促进Bax表达，激活Bc卜2(Bax)一Caspase信号通路有关。

6、关键词放射增敏；肺癌细胞；洛铂；凋亡东南大学硕士学位论文Studyofef

7、'ectonlungcancercellA549treatedbylobaplatincombinedwithradiationAbstractobjectiVe：LungcarcinomaisoneofthemostcommonmalignanttumorsaUovertheworld．Theproponionofnon-small-ceU1ungcanceris80％．LungcallcerwasalwaysdetectedatadVancedstageonaccountofitsobscu

8、resymptomoccurrence，whichcouldresultinimpossibilityofsu略eⅨwhileradiotherapygaVethehopeofcurabilitytothepatientsofnon‘operation．NeVenhelesstheonlyradiotherapyoRenbrou曲tlittlee脏ctbecauseofmicro‘metastasisrootaJldlargenumberoftumorcells．Therefore，radiotherapycombinedwithchem