华蟾素和顺铂对骨肉瘤MG-63细胞联合杀伤作用的研究-论文.pdf

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1、224.中国骨与关节杂志2014年3月第3卷第3期ChineseJournalofBoneandJoint,March2014,Vol3,No.3·论著Originala~icle华蟾素和顺铂对骨肉瘤MG一63细胞联合杀伤作用的研究宋科官张涛严峰孙远新王海周永飞DOI:10.39698.issn.2095—252X.2014.03.016中图分类号:R738.1基金项目:黑龙江省教育厅资助项目(11521165)作者单位:150001哈尔滨医科大学附属第一医院骨科通信作者:周永飞,Email:jingzyfei@s

2、ina.eom【摘要】目的探讨比较华蟾素(cinobufagin)协同顺铂(cisplatin)对人骨肉瘤细胞株MG一63的杀伤作用。方法体外培养骨肉瘤细胞株MG一63细胞,取对数生长期细胞进行实验;采用MTT比色法测定MG一63细胞的生长抑制作用并计算细胞抑制率;流式细胞仪检测骨肉瘤细胞的凋亡率和细胞周期,观察细胞凋亡率的变化情况和药物对细胞周期的抑制作用;原位末端标记法(TUNEL)观察骨肉瘤细胞的凋亡情况并检测细胞凋亡率;相差显微镜观察骨肉瘤细胞生长状况及形态学上的改变。结果华蟾素和顺铂均对骨肉瘤细胞有生长抑

3、制作用,华蟾素组、顺铂组及华蟾素+顺铂组在药物浓度不同时对骨肉瘤细胞的生长抑制作用各不相同,在药物浓度低于80/ml时,各实验组药物对细胞的生长抑制作用随药物浓度的增加而上升;当药物浓度达到80g/ml时,华蟾素组和顺铂组药物对骨肉瘤细胞的生长抑制作用不再增加,但华蟾素+顺铂组药物对细胞的生长抑制作用在药物浓度达到160gg/ml时,抑制作用仍强于其浓度为8Og/ml时。各实验组在药物浓度相同时华蟾素+顺铂对骨肉瘤细胞的生长抑制作用明显强于单独应用华蟾素或者顺铂。结论华蟾素+顺铂对骨肉瘤MG一63细胞的联合杀伤作用

4、明显强于单独应用顺铂或者华蟾素;在抑制骨肉瘤MG一63细胞生长方面,华蟾素协同顺铂对细胞的杀伤作用效果显著,并且具有时间和浓度依赖性。【关键词】骨肉瘤;顺铂;细胞凋亡;骨肿瘤AstudyofcombinedkillingeffectsofcinobufaginandcisplatinonosteosarcomaMG-63cellsSONGKe-guan.ZHANGTao,ⅣFeng,SUNYuan-xin,WANGHai,ZHOUYong-fei.DepartmentofOrthopedics,thefirstAf

5、iliatedHospitalofHarbinMedicalUniversity,Harbin,Heilongjiang,150001,PRC【Abstract】ObjectiveToinvestigateandcomparekillingeffectsofcinobufaginandcisplatinonhumanosteosarcomaMG一63celllines.MethodsOsteosarcomaMG一63celllineswereculturedinvitro,andlogarithmicgrowthp

6、hasecellswereselectedforexperiments.Themethylthiazolyltetrazolium(MTT)colorimetryassaywasusedtodeterminethegrowthinhibitoryefectsonMG·63cellsandtocalculatethecellinhibitoryrate.Theflowcytometrywasusedtodetecttheapoptosisrateandcellcycleofosteosarcomacells,andt

7、oobservethechangesofcellapoptosisratesandtheinhibitoryefectsofdrugsoncellcycles.Theinsituterminaldeoxynucleotidyltransferase(TdT)-mediateddUTP—Xnickendlabeling(TUNEL)wasusedtoobservetheapoptosisrateofosteosarcomacellsandtodetectthecellapoptosisrate.Theosteosar

8、comacellgrowthstatusandmorphologicalchangeswereobservedbythephasecontrastmicroscope.ResultsBothcinobufaginandcisplatincouldinhibitthegrowthofosteosarcomacells.Inthecinobufagingroup

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