CIK增强顺铂对肺腺癌细胞系A549的杀伤作用.pdf

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1、临床检验杂志2013年12月第31卷第12期ChinJClinLabSci，Dec．2013，Vo1．31，No．12·9l5··基础实验诊断研究·文章编号：1001-764X(2013)12-915-04CIK增强顺铂对肺腺癌细胞系A549的杀伤作用李丹，李种，张克新，王智刚，徐斌，邓海峰，陆明洋，李敏，周怡，孙青，刘检，郑晓，蒋敬庭(苏州大学附属第三医院a．呼吸内科，b．肿瘤生物诊疗中心，江苏常州213000)摘要：目的研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合顺铂对人肺腺癌细胞系A549的杀伤作用。方法在体外将健康者外周血单个核细胞(PBMC)用细胞因子诱导形成具有

2、杀伤活性的CIK细胞。CIK、顺铂及CIK联合顺铂分别作用A549细胞24、48h，MT／"法检测细胞吸光度(A)值并计算各组细胞杀伤率。完全培养液培养CIK48h后，取上清液，按1：l稀释后与A549细胞共培养24h，用流式细胞仪检测A549细胞凋亡率。结果CIK、顺铂对A549的杀伤活性呈时间、剂量依赖性(P<0．05)。5g／mL顺铂联合效靶比为10：1、20：1的CIK共同作用A549细胞24h，A549的杀伤率(％)分别为53．80±6．81，61．17±3．82，与单用顺铂及CIK相比，其对A549的杀伤率显著升高(P<0．05)。CIK上清液可诱导A549

3、细胞凋亡。结论CIK可增强顺铂对A549细胞系的杀伤作用。关键词：肺肿瘤；肺腺癌细胞株；细胞因子诱导的杀伤细胞；顺铂中图分类号：R734．2文献标志码：ACIKmayenhancethelethalefectofcisplatinonthelungadenocarcinomacelllineA549LIDan。，LIChong“，ZHANGlie—xin，WANGZhi—gang。，XUBin，DENGHai-feng，LUMing—yn，LIMin，ZHOU，SUNQ，L，uJian，ZHENGXiao，JIANGJing—ting(a．DepartmentofRes

4、piratoryMedicine，b．TumorBiologicalDiagnos~andTreat—mentCenter，theThirdAffiliatedHospitalofSoochoowUniversity，Changzhou213000，Jiangsu，China)Abstract：ObjectiveToinvestigatethelethaleffectofcytokine—inducedkillercells(CIK)combinedwithcisplatinonthehumanlungadenocarcinomacelllineA549．Methods

5、Theperipheralbloodmononuclearcells(PBMC)fromhealthypersonswereinducedtobetheCIKcellswitheytotoxicitybycytokinesinvitro．Then，A549cellswereincubatedwithCIK，cisplatinandCIKcombinedwithcisplatinfor24and48hours，respectively．ThekillratiosofA549ceilsweredetectedbytheMTTassay．AfterCIKcellswerein

6、cuba—tedwithcompleteculturemediumfor48h，thesupernatantwascollectedanddiluted1：1withmedium，andthenincubatedwithA549cellsfor24h．Next，theapoptosisrateofA549cellswasdetectedbyflowcytometry．ResultsBothCIKandcisplatinkilledA549cellsinadose—andtime—dependentmanner(P<0．05)．AfterA549cellswereincu

7、batedwith5mLofcisplatincombinedwithCIKwith10：1and20：1ofeffector—targetratiosfor24h，thekillratiosofA549cellswere(53．80±6．81)％and(61．17±3．82)％，respectively，whichweresignificantlyhigherthanthatofcisplatinorCIKalone(P<0．05)．ThesupernatantofCIKcellscouldinducetheapoptosisofA54