CIK分泌的细胞因子对逆转耐顺铂肺腺癌细胞系A549／DDP耐药性的研究-论文.pdf

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1、中国肿瘤临床2013年第403g-~12期ChinJClinOncol2013，Vo1．40No．12WWW．cjco．ciq685基础研究·ClK分泌的细胞因子对逆转耐顺铂肺腺癌细胞系A549／DDP耐药性的研究：l：熊艳娟①杜春娟②于津浦①曹水①摘要目的：探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokineinducedkiller，CIK)分泌的细胞因子在逆转耐顺铂(DDP)人肺腺癌细胞系A549／DDP顺铂耐药性中的可能作用。方法：采用transwell非接触共培养CIK与A549／DDP细胞，收集不同时间点的共培养上清，酶联免疫试剂方法(ELISA)检测IFN一、TNF一、IL一2的分

2、泌情况，四氮甲唑兰比色法(MTT法)检测DDP耐药性的变化，实时定量PCR检测GST一盯基因表达水平的变化。结果：分析发现A549／DDP细胞的耐药逆转与IFN一的分泌水平显著相关，与TNF—ol、IL一2的分泌量无显著相关。给予anti—IFN一中和抗体后，共培养20hA549／DDP的DDP耐药性显著上升(P<0．05)，GST一叮T基因水平的表达量较未加中和抗体组也显著增加(P<0．05)。而加入anti—TNF—ot、anti—IL一2中和抗体组，A549／DDP细胞的DDP耐药性及GST一丌基因水平的表达量较未加入中和抗体纽无明显变化(P>0．05)。结论：CIK通过分泌IFN

3、一下调A549／DDP细胞中GST一^y的表达来实现其逆转DDP耐药的作用。关键词细胞因子诱导的杀伤细胞肺腺癌GST一1TIFN一doi：10．3969／j．issn．1000—8179．2013．12．001Cytokinessecretedbycytokine．．inducedkillercellsmodulateresis．．tancetocisplatinintheA549／DDPcelllineYanjuanXIONG。，ChunjuanDU，JinpuYUShuiCAOCorrespondenceto：ShuiCAO；E—mail：caoshui@yahoo．comDepar

4、tmentofCancerBiotherapy,TianjinMedicalUniversityCancerInstituteandHospital，KeyLaboratoryofCancerPreven—tionandTreatmentofTianjinCity,Tianjin300060，ChinaDepartmentofOncology,BinzhouMedicalCollege，Binzhou256603，ChinaThisworkwassupportedbyfundationsfromtheTianjinMunicipalResearchProgramforBasicScien

5、cesandFrontierTechnolo—gY(No．09JCZDJC20400)AbstractObjective：Thisstudyaimedtoexplorethepossiblerolesofcytokinessecretedbycytokine—inducedkiller(CIK)cellsinreversingtheDDPresistanceofA549／DDP．Methods：Supernatantsofco—culturedsystemswerecollectedtodetectthelevelsofIFN一1，，TNF—d，andIL一2usingenzyme—li

6、nkedimmunosorbentassay(ELISA)．Thecorrelationsbetweencytokinesandresistancerever—salindiceswereanalyzedatdiferentco—culturedtimepoints．SpecificneutralizingantibodiesagainstIFN—Y，TNF—ot，andIL一2wereaddedtotheco—culturedsystemtoevaluatetheefectsoftheaforementionedcytokinesonreversingDDPresistanceinA5

7、49／DDP,aswellasontheexpressionofGST-~gene．Results：ELISAandcorrelationanalysesshowedthatIFN一1，wasrelatedtothereversalofDDPresistanceofA549／DDRAfterneutralizationbyanti—IFN—Yantibody,theDDPresistanceofA549／DDPco—cultured