XAF1基因对顺铂诱导肺腺癌A549细胞凋亡作用的研究-论文.pdf

《XAF1基因对顺铂诱导肺腺癌A549细胞凋亡作用的研究-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、中华肿瘤防治杂志20l3年1O月第2O卷第19期CHINJCANCERPREVTREAT，October2013，Vo1．20No．19·1499·《实验研究／论著lXAF1基因对顺铂诱导肺腺癌A549细胞凋亡作用的研究朱传东王礼学郭晶晶耿杰徐瀚峰张全安郑勤东南大学附属第二医院肿瘤科，江苏南京210003【摘要】目的：通过顺铂诱导人肺腺癌细胞A549的凋亡，研究X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(X—linkedinhibi—torofapoptosisproteinassociatedfactor-1，XAF1)基因在A549细胞中的表达情况，初步探讨

2、该基因在凋亡中的作用。方法：采用4~g／mL浓度的顺铂处理A549细胞，MTT法检测细胞的增殖抑制率；AnnexinV／7一AAD检测A549细胞凋亡情况；RT—PCR和蛋白质印迹法分别检测A549凋亡后XAF1mRNA和蛋白的表达；Caspase一3试剂盒检测A549细胞凋亡后Caspase一3的活性。结果：用4fg／mL浓度顺铂处理A549细胞2、l2和24h后，A549细胞增殖抑制率分别为(3．4O±0．65)、(8．31±0．73)和(14．724-0．24)，与对照组(1．O3士0．28)相比均明显增高，P值分别为0．004、0．000和0．0

3、00，细胞增殖抑制率随时间增加而增强；A549细胞凋亡率分别为(4．35±0．95)、(9．69±2．60)和(22．35±1．24)，与对照组(1．394-0．21)相比均明显增加，P值分别为0．006、0．005和0．000，细胞凋亡率随顺铂作用时间延长而增加；实验组xAF1mRNA表达水平分别为(0．199±0．029)、(0．654±0．093)和(1．216-4_-0．101)，对照组为(0．091±0．020)，XAF1mRNA表达水平随作用时间的延长呈增加趋势，P值分别为0．006、0．001和0．000；实验组xAF1蛋白表达水平分别为(

4、0．322±0．041)、(0．508±0．014)和(0．901土0．014)，对照组为(0．124±0．007)，XAF1蛋白表达水平随作用时间的延长呈增加趋势，P值分别为0．001、0．000和0．000；C~tspase一3活性(A405nm)分别为(34．745±3．781)、(69．524±3．096)和(94．787±5．429)，对照组为(21．914±1．962)，Caspase一3活性随顺铂作用时间的延长而增加。结论：顺铂诱导A549细胞凋亡可以引起XAF1表达增加，且随细胞凋亡水平的提高而增加，提示XAF1可能参与顺铂诱导人肺腺癌A

5、549细胞的凋亡过程。【关键词】肺肿瘤；顺铂；A549细胞；X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1；细胞凋亡；印迹法，蛋白质中华肿瘤防治杂志，2013，20(19)：1499一l502EffectofXAF1geneonlungadenocarcinomaA549cellapoptosisinducedbycisplatinZHUChuan—dong，WANGLi—xue，GUOJing—jing，GENGJie，XUHan—feng，ZHANGQuan—an，ZHENGQinDepartmentofOncology，SecondHospitalAffili

6、atedtoSoutheastUniversity，Nanjing210003，P．R．China[-ABSTRACT]OBJECTIVE：BasedontheapoptosisprocessofA549cellsinducedbycisplatin，weresearchedtheexpres—sionandfunctionsoftheXAF1gene．METHODS：TheproliferationinhibitionrateafterA549cellstreatedwiththecispla—tinof4fg／mLwasdetectedbyMTT．T

7、heA549cellapoptosiswasdetectedbyAnnexinV／7一AAD．TheXAF1mRNAandproteinexpressionwasmonitoredbytheRT—PCRandwesternblotting．TheCaspase一3activityinapoptoticA549cellswasdetectedbytheCaspase一3assay．RESULTS：Thecellproliferationinhibitionrateincreasedwiththecisplatintreatingduration．Thece

8、l1proliferationinhibitionratesoftheexper