陆地棉开花相关基因ghflp1的克隆与功能验证

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1、棉花学报CottonScience2016,28(3):199―207陆地棉开花相关基因1的克隆与功能验证1,222221,2*张盼袁范术丽袁宋美珍袁庞朝友袁魏恒玲袁喻树迅(1.西北农林科技大学农学院袁陕西杨陵712100曰2.中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室袁河南安阳455000)摘要院为了明确陆地棉开花促进因子基因的作用袁以中棉所36叶片基因组DNA和cDNA为材料克隆得到了开花相关基因1袁分析了其特征及功能遥该基因全长为537bp袁包含339bp开放阅读框袁编码112个氨基酸遥预测分子量约为12.176kD

2、a袁理论等电点为9.13遥组织特异性表达分析表明袁该基因在花蕾中优势表达袁且在早熟品种渊中棉所36尧中棉所74冤中表达量高于中熟品种渊中棉所60尧鲁棉研28冤遥启动子序列分析和外源激素处理实验表明该基因受水杨酸和赤霉素调控遥农杆菌介导转化拟南芥发现袁该基因能促使拟南芥莲座叶减少袁开花期提前遥荧光定量结果表明袁在转基因拟南芥中袁内源开花相关基因尧尧1和1表达量不同程度上调袁表达量基本不变袁表达量下调遥研究结果显示该基因可能参与陆地棉开花时间的调控袁为创制转基因早熟棉花新材料打下基础遥关键词院1曰曰开花曰基因克隆曰基因表达曰荧光定量检

3、测中图分类号院S562.03文献标志码院A文章编号院1002-7807渊2016冤03-0199-0910.11963/issn.1002-7807.2016030021,222221,2*ZhangPan,FanShuli,SongMeizhen,PangChaoyou,WeiHengling,YuShuxun(1.712100,;2.455000,)Toidentifythefunctionoffloweringpromotingfactorgenes,weused1,afloweringrelatedgeneclonedfr

4、omanuplandcottonvarietyCCRI36(L.),forsequencingandfunctionanalysis.Thefull-lengthofthecDNAwas537bp,anditincludesa339-bpopenreadingframeencodingaproteinof112aminoacids.Molecularmasswaspredictedtobe12.176kDa,andthebasicisoelectricpoint9.13.Expressionanalysisindifferentt

5、issuesrevealedthegenewasstronglyex-pressedintheflowerbud,andhigherexpressionlevelsweredetectedinprematurevarieties.Aphytohormonetreatmentexperi-mentrevealedsalicylicacidandGibberellinpositivelyregulated1ina24-htime-course.Transgenicplantscarrying1exhibitedsignificantl

6、yfewerrosetteleavesandfloweredearliercomparedwiththewild-typeplants.qRT-PCRssuggestedexpressionof,,and1waselevated,1andexpressionwasunchanged,andexpressionwassuppressedintransgeniccomparedwiththewild-type.Theresultspreliminarilysuggestaninvolvementof1intheregulationof

7、floweringtime,andprovidefurthergeneticresourcesforthebreedingofshortseasoncotton.1;flowering;genecloning;geneexpression;qRT-PCR[1-2][4]随着棉花基因组测序的完成袁对于寻找能成遥植物开花相关基因的功能研究和利用袁对于[3]够使棉花生育进程提前并且兼顾产量和品质的改变植物生育期尧产量尧品质等方面有重要影响遥功能基因具有重要意义遥开花是植物由营养生长从拟南芥渊冤中克隆出来的向生殖生长转变的关键时期袁受温度

8、尧光周期等1渊Flowering-promotingfactor1-likeprotein1冤多种环境因子的调控袁并在基因的调节作用下完同源基因1渊Floweringpromotingfactor1冤袁经收稿日期院2015-11-25作者简介院张盼

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