芋淀粉分支酶sbe基因的克隆与表达分析

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1、园艺学报，2016，43(10)：2049–2058.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0307；http：//www.ahs.ac.cn2049芋淀粉分支酶SBE基因的克隆与表达分析1,211,*1顾绘，陈赛男，李良俊，程立宝12（扬州大学园艺与植物保护学院，江苏扬州225009；南通科技职业学院，江苏南通226007）摘要：以多子芋品种‘香堂芋’幼嫩叶片为试材，利用RACE结合RT-PCR技术克隆得到全长为3051bp的淀粉分支酶SBE基因cDNA序列（登录

2、号：KX013544），其中开放阅读框长2538bp，编码845个氨基酸；该序列与玉米SBEII、马铃薯SBEIIa同源性均达85%以上；芋SBE编码蛋白具有N–末端、C–末端和α–淀粉酶催化域。利用RT-PCR技术克隆得到芋SBE的基因组DNA序列，全长为12362bp，包括20个外显子和19个内含子。芋球茎形成过程中，子芋植株叶片中SBE表达量显著高于母芋植株叶片、叶柄和根系及母芋等组织，子芋膨大过程中SBE表达量逐渐升高，而孙芋膨大过程中SBE表达量逐渐下降。子芋、孙芋SBE表达对支链淀粉合成积累可能起重要作用。关键词：芋；淀粉分支酶基

3、因；克隆；表达中图分类号：S632.3文献标志码：A文章编号：0513-353X（2016）10-2049-10CloningandExpressionAnalysisofStarchBranchingEnzymeGeneinTaro（Colocasiaesculenta）1,211,*1GUHui，CHENSai-nan，LILiang-jun，andCHENGLi-bao12（SchoolofHorticultureandPlantProtection，YangzhouUniversity，Yangzhou，Jiangsu225009，C

4、hina；NantongScienceandTechnologyCollege，Nantong，Jiangsu226007，China）Abstract：Inthisstudy，asolublestarchbranchinggene（SBE）wasisolatedfromtheleafof‘Xiangtangyu’，aspeciesoftarobasedonRT-PCRandPCR-RACEmethods.Thefull-lengthofSBEcDNA（GenBankaccessionnumberKX013544）was3051bpinnuc

5、leotidecontaininganopenreadingframeof2538bpwhichencoding845aminoacids.PhylogeneticanalysisshowedthatSBEhadmorethan85%homologwithmaize，potatoandrice，respectively.SBEproteincontainedN-terminalend，C-terminalendandalphaamylasecatalyticdomain.DNAsequenceofSBEwasclonedbyRT-PCRmet

6、hod，andthefulllengthofDNAwas12362bpwith20exonsand19introns.DuringcormformationtheexpressionofSBEinleafofson-taroplantswassignificantlyhigherthanthatofmother-taroplants，leafstalks，roots，mother-taroandsoon，theexpressionwasimprovedinson-taros，anddecreasedingrade-taroswithdevel

7、opmentofcorm.Totally，webelievedthattheexpressionofSBEwassynchronouswithamylopectinsynthesisinson-tarosandgrade-taros.Keywords：Colocasiaesculenta；starchbranchinggene；clone；expression收稿日期：2016–07–05；修回日期：2016–10–20基金项目：江苏省科技支撑计划项目（BE2013388）*通信作者Authorforcorrespondence（E-mail

8、：ljli@yzu.edu.cn）GuHui，ChenSai-nan，LiLiang-jun，ChengLi-bao.Cloningandexpressionana